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查看: 21071\|回复: 3	go 求助：加入配型的血浆培养 BMSC 24小时培养基在培养箱里成凝胶了，谢谢 [复制链接]

缥飘实验员

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楼主

发表于 2017-7-13 13:47 |只看该作者 |正序浏览 |打印

加入配型的血浆培养 BMSC 24小时培养基在培养箱里成凝胶了，血浆在-20度存放2个月，血库购买的血浆融化分装后存储在-20度，谢谢- H0 |- y) q% I. F# k: {
最近，培养 BMSC 怎么都养不出来，请问谁有 serum-free 体系么，谢谢

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板凳

发表于 2017-7-13 15:38 |只看该作者

回复 fenglinzhu 的帖子7 ?( y" s) k3 i& l: Y& N
4 B- n% Y; u9 f; q/ v6 d& f6 B
血浆是灭活的，估计要离心或者过滤一下了，谢谢

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fenglinzhu

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藤椅

发表于 2017-7-13 14:34 |只看该作者

回复缥飘实验员的帖子% r9 Z' p; J+ |+ T) Q" Z! S

血浆中含有大量高分子蛋白，这些蛋白在培养基中培养一段时间后会形成一层凝胶状薄膜，从而阻碍细胞呼吸，导致细胞死亡。56℃，30min灭活可使这些蛋白失活，可以很大程度的避免这样的问题出现，如果灭活后还出现这样的情况，可考虑用0.22um滤膜过滤，或3000G高速离心后取上清培养