脐带间充质干细胞消化结团，成片成膜样脱落，收集有丝状沉淀

zuishui

脐带间充质干细胞消化结团，成片成膜样脱落，收集有丝状沉淀，
  \9 M" w# t3 [! G# ]是消化时间过长，还是胰酶抑制剂用量不足？0.05胰酶消化2min啊，是不是细胞长得太密，消化的晚了才这样？

随时准备下线

我遇到过，将细胞传代比例加大，同时传代时细胞不要太密有没问题了。跟胰酶关系不大！

淘知路遥

细胞密度太大了，控制接种密度或提前收获

fenglinzhu

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' ?5 Z9 @! r. Y, C: p/ {* Y. W% {: F! c% R* z
多吹打一下，可以把细胞吹散的

baby00000003

这个可能就是因为酶里面细胞密度太大，多加酶，多用点PBS稀释，就好了。
4 F. U- }, Y$ C- N2 m舍得花钱就加极少量的HSA就可以防止细胞成团。# @$ g, x$ [; ]1 W  `
其实随时用枪吹吹都可以散开的，也不用太在意啦～

杏色玻璃

细胞长太密，融合度过高，消化时间过长都可能造成在消化过程中出现细胞成膜脱落的现象的

zuishui

确实我传代的密度比较大，消化的也比较晚，感觉没长那么密实，看来以后要控制传代密度或者及早传代~

zuishui

回复 baby00000003 的帖子9 T% q2 q9 P, q$ W6 u' a; m2 c0 ^' s

+ s6 }4 l. G" n% L0 W0 r我的结团比较严重，吹不散，直接过滤了

baby00000003

! R/ B0 G3 v2 T' g( y5 I0 \+ {# _
! s+ }0 n  y! ], M8 Z回复 zuishui 的帖子1 W0 k  c1 e% _
+ ?( G$ ]* P0 L
噢～换用尖嘴细一点的移液管试试看～+ |8 b. K5 [; p. C2 x
用最高速吹吸，避免气泡～' O7 u, q$ p% l. D5 N
嗯.....如果吹不散，可能就是细胞长得太密了，卷边卷成的球，那就没治了. n* I+ b" z" B8 \8 O: x
# `% _+ e7 J; y
推荐用gibco的1XtrypLE，比自己配的那个好用方便～

zuishui

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, J: W7 R9 {/ A# V# \% |$ `- n4 J1 k6 w$ V+ e
胰酶用的是GIBCO的 0.25%，我给稀释到0.05%的。2 U  s! A" \: E4 H6 w
( t  i8 E9 i/ M5 |) A
检测出来流式效果比较差~