脐带间充质干细胞消化结团，成片成膜样脱落，收集有丝状沉淀

zuishui

脐带间充质干细胞消化结团，成片成膜样脱落，收集有丝状沉淀，
) k, U& y$ }" k' w! M5 @/ l是消化时间过长，还是胰酶抑制剂用量不足？0.05胰酶消化2min啊，是不是细胞长得太密，消化的晚了才这样？

随时准备下线

我遇到过，将细胞传代比例加大，同时传代时细胞不要太密有没问题了。跟胰酶关系不大！

淘知路遥

细胞密度太大了，控制接种密度或提前收获

fenglinzhu

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6 ~9 p$ Q' j$ e# t' e4 `4 F0 Y2 D$ p7 q; F
多吹打一下，可以把细胞吹散的

baby00000003

这个可能就是因为酶里面细胞密度太大，多加酶，多用点PBS稀释，就好了。
* y; ?) A. k2 H3 U9 Y4 n$ Z+ [舍得花钱就加极少量的HSA就可以防止细胞成团。
( B$ o' c. B8 v其实随时用枪吹吹都可以散开的，也不用太在意啦～

杏色玻璃

细胞长太密，融合度过高，消化时间过长都可能造成在消化过程中出现细胞成膜脱落的现象的

zuishui

确实我传代的密度比较大，消化的也比较晚，感觉没长那么密实，看来以后要控制传代密度或者及早传代~

zuishui

回复 baby00000003 的帖子  s0 f" C$ Y* X
+ J4 x7 [. Q; r" j+ l
我的结团比较严重，吹不散，直接过滤了

baby00000003

: D4 q9 S) S# }4 s& k- `& R% q- S6 A$ ^# C
回复 zuishui 的帖子8 r/ Z1 T- H! r' a9 O/ ]) G

: G  Y  R" p0 c% K! R! c噢～换用尖嘴细一点的移液管试试看～
/ ]1 Q: q/ _% N, s% w. h7 F用最高速吹吸，避免气泡～2 l6 D# P! z* u0 a( d8 }; c$ y
嗯.....如果吹不散，可能就是细胞长得太密了，卷边卷成的球，那就没治了
0 p  \# L* J2 S% ^
  N, f1 Y2 a# F5 i' L( }: U推荐用gibco的1XtrypLE，比自己配的那个好用方便～

zuishui

回复 baby00000003 的帖子, n4 F- g- k4 A) ^1 }
" C1 }7 J) s2 k6 y& H9 z
胰酶用的是GIBCO的 0.25%，我给稀释到0.05%的。
( V7 A" @8 P8 ]6 h/ s; T  {: z1 R9 b8 D" t; q# ?
检测出来流式效果比较差~