骨髓间充质干细胞原代培养换液问题讨论

tiangao

文献多数是密度梯度离心来出去红细胞和白细胞，这样接种就5天换液，如果全骨髓培养，报道是48小时，但是我培养的换过液后细胞就非常少了。强烈建议按照文献密度梯度离心后5天第一次换液。

tiangao

我一般在分离后的30小时换液，以后就2－3天换一次，效果很好。

tiangao

我是新手，关于细胞培养换液有很多疑问，请各位给讲解一下：
  n; ^7 `. {3 H7 Q; l$ E+ p1，骨髓间充质干细胞原代培养液为何种培养液？1 b7 [* g& `! q) n1 C- ]7 R
2，半定量如何操作？
7 L( }8 |, X# g7 s. Z3， 全骨髓培养法分离培养骨髓间充质干细胞，不是等到7天左右，观察到典型的细胞形态后才进行传代培养吗？0 i$ K2 M$ \# V  w  e1 g' R
4，细胞如何进行计数？8 W2 W" j$ K0 h, N1 f
新手，这些问题都是最基本的，请各位老师别见笑。***！

tiangao

我是36小时首次半量换液，然后72小时全量换，以后隔天换一次，效果还可以

tiangao

我也在养 请问有用密度梯度法分离的吗？效果如何 我第一次提的基本没长 还有就是 细胞一贴壁就开始形状改变吗/

tiangao

第二天都贴壁了吗？不是5天才换吗？

tiangao

分离后第二天换就行了，我们都是这样做的，效果很好