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细胞计数用细胞计数板呀！方法如下：
X. l( S% M6 F* c细胞计数板，通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。 7 }+ \8 F8 X* _$ l2 |$ j! w
" V+ u: V w/ l! w4 F9 w+ c
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格，总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的。 : w$ _, _" C7 c$ a) M5 ~/ m
$ x7 H8 q$ g0 i$ C1 B+ b9 B
每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积为1㎜2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜3。其计算方法如下：
4 _& J( d! w; C) @
- N2 n W0 T& ]; ~# f# \1．16×25的计数板计算公式
+ F, d4 [2 L8 W0 q: a+ \3 T% l% U
细胞数 ml=(100小格内的细胞数 100)×400×1000×稀释倍数 . X3 O& p4 ~- j5 [
* n- S( x9 y/ M8 ]5 e2．25×16的计数板计算公式 4 M$ w4 ~/ u* G* v
. ?) R6 G( ?+ o Y8 h* q
细胞数 ml=(80小格内的细胞数 80)×400×1000×稀释倍数 k9 K/ d+ A3 |, K
! O' Q& e3 M$ f1 f实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。6 W' j1 O) S0 h5 P; y- }5 z
具体操作：
7 i: g7 q/ L% o W1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
1 h) a7 g* i1 x2 h4 }) ~2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。. v" B/ J# g1 ~- E
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算：* w$ i8 m& u& M
细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104: U/ f R9 z. r1 F4 g$ k; A
说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。9 V2 Z/ {: t- T9 q/ L+ p
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：
. a9 @2 I8 @. Z1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3/ o' m+ n; w" y# j6 [
（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液） |
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发表于 2010-5-20 07:47
