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小鼠囊胚细胞差异染色方法   [复制链接]

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楼主
发表于 2009-9-25 20:22 |显示全部帖子
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沙发
发表于 2009-9-25 21:01 |显示全部帖子
本帖最后由 抹茶跑跑 于 2009-9-25 21:07 编辑 # |3 t6 V( o7 U5 Z7 q. p  g
* B% `8 P0 k9 y# s
有一个疑问,豚鼠补体(sigma)是冻干粉
5 S. V8 B1 A, p“1:10 稀释的豚鼠补体(guinea pig complement) :将1 份体积豚鼠补体和9 份0.1% PVA 的PBS相混合”
6 |- r. ]) K% m) M1 o  D这里提到的一份体积豚鼠补体,是指冻干粉溶解之后配成的液体吗,豚鼠补体冻干粉标明的是5ml装,冻干粉不是mg而是ml吗?是指要先用5ml液体把冻干粉配成5ml豚鼠补体溶液?
9 j$ ?! Y! ~+ {% @! N  g: o- b那么冻干粉是用什么溶解呢1 z8 B& m. {  m3 _6 r' [

9 X( p: d4 A* ?% m5 O% J9 [冻干粉是怎么配的,一份体积指的是什么,有点糊涂
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藤椅
发表于 2009-9-26 12:25 |显示全部帖子
本帖最后由 抹茶跑跑 于 2009-9-26 12:26 编辑 ' L% S9 u% R6 T: Q; \. V0 |% H

  |6 Z4 s% ~. V many thanks

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板凳
发表于 2009-9-26 20:10 |显示全部帖子
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本帖最后由 抹茶跑跑 于 2009-9-26 20:13 编辑 6 @2 [, c+ Q3 w0 T0 F6 j

. s& b! n; y2 A7 a之前查过豚鼠补体的说明书(sigma),但是没有找到具体的配置方法,请高手帮忙看下,谢谢
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报纸
发表于 2009-9-26 20:37 |显示全部帖子
本帖最后由 抹茶跑跑 于 2009-9-26 21:06 编辑 1 Y$ m; \- x$ `, X) K1 V

6 {8 r: {3 y( n# O$ V! o. P7 B( O看了版主的文献,很有帮助
  F% [- H/ d4 n还有些细节,没有找到答案
0 N  Z* ~/ O: v$ o- z! |1.0.5%的链霉蛋白酶,PBS配置后过滤分装* M. T- z* r5 C5 [0 |6 R
  配液用的PBS,是调好的PBS直接可以用,还是需要用灭菌PBS,配好备用的PVA-PBS还需要灭菌再用吗;过滤分装的具体操作是什么样的,0.22微米的滤器过滤吗?+ d9 l: `  W+ e( m! T
& p0 T! f* L! C+ i( Z+ V6 L2 R
2.胚胎放入抗血清中作用后,用于终止抗体反应的10%血清的PVA-PBS,是指10%豚鼠补体吗?PVA-PBS洗涤后,再次放入含PI、Hoechest33342的豚鼠补体中吗?# A6 u2 f7 ?4 E+ ]& X6 c4 }

7 n8 k8 U+ t( G  Q$ U谢谢前辈的回答
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