ips实验中体细胞用逆转录病毒感染后细胞死亡的原因

wyannb

我在做ips实验的时候，用包被出来的病毒感染体细胞结果后的第一天还是完好的，等到第二天消化下来接种到饲养层上去的时候发现有很多细胞发生死亡，请各位大侠帮忙分析原因，帮忙讨论，谢谢

liushen163

尝试用PB转座子试试？

franklinhg

个人认为有可能是以下原因：1 细胞消化过度 2 病毒的量过大 3 培养基变化太大或者血清质量问题

lingren

查看更换的培养基，细胞很有可能不适应，更换的时间需要摸条件，最好第一天不要换！

wyannb

没有，我用的是常用的pmx质粒型的逆转录病毒

lingren

病毒量太大细胞也会死

wyannb

我怀疑是不是病毒滴度太高了呢，但我这个质粒上不带有GFP的，现在还不清楚怎么样测滴度啊

wyannb

回复 3# franklinhg # j' o! ]5 h7 i7 c+ Z

- E% S  v! {9 A. ~8 ?! f$ y* s
' x, a7 o1 A8 n! m, n! g    我觉得你说的第一和第二条非常有可能，可能是消化的过度或者是病毒的量过大，但是病毒量怎么把握呢，是不是要测病毒滴度啊

上海过客

那就 稀释 一些 再 试试   。

wyannb

回复 9# 上海过客 ( s) g2 }3 {2 W! s/ w3 }% C
上海过客，谢谢您的指点