ips实验中体细胞用逆转录病毒感染后细胞死亡的原因

wyannb

我在做ips实验的时候，用包被出来的病毒感染体细胞结果后的第一天还是完好的，等到第二天消化下来接种到饲养层上去的时候发现有很多细胞发生死亡，请各位大侠帮忙分析原因，帮忙讨论，谢谢

双刀

你是怎么消化的？消化的时候也会死一些，但是注意点就没问题。关于滴度，可以用GFP的质粒测。

friendly0722

还是接到饲养层上第二天再换ips的培养液吧

gemstone

最有可能的是病毒滴度太高，其他的原因不太可能！

wyannb

是啊，如果你的质粒上带有GFP就方便多了，转染和感染效率都能看出来了。我的也是不带有gfp的所以做起来很费力。建议如果你要是继续做的话就弄一些带有gfp的质粒转染，很方便。

lixiaoxu

我用的也是PMXS质粒，病毒感染后经常出现细胞大量死亡现象，没有筛选标记，不知道怎么去鉴定感染效率，晕死。

wyannb

回复 9# 上海过客 9 m' ]- m; @! t( r9 m8 w
上海过客，谢谢您的指点

上海过客

那就 稀释 一些 再 试试   。

wyannb

回复 3# franklinhg
- p+ c+ w7 Y/ I! k4 k3 B, K0 w% z# Q

- d0 j3 k7 r+ M' [. w4 o    我觉得你说的第一和第二条非常有可能，可能是消化的过度或者是病毒的量过大，但是病毒量怎么把握呢，是不是要测病毒滴度啊

wyannb

我怀疑是不是病毒滴度太高了呢，但我这个质粒上不带有GFP的，现在还不清楚怎么样测滴度啊