IPS分化时要不要沉默掉前期导入的外源转录因子？

ghfvcat

请问大家在做IPS的时候，做到后面分化时要不要沉默掉前期导入的外源转录因子?* d. w3 P% W" G4 L6 c0 T# w% Y" d
我在一篇中文的文章上看到这么一句话，在人iPS形成之后，逆转录病毒载体使4个转基因沉默（与在小鼠系统中的发现一样），这说明iPS细胞完全重新编程，不再依赖于转基因的表达，请问有人知道这句话的原来的出处在哪儿么？ . u; c2 n2 u  y0 F$ F: t
iPS细胞完全重新编程，不再依赖于转基因的表达，这我可以理解，但是导进去的外源转录因子会在IPS形成之后自动沉默么？还是会在随之而来的分化中由细胞的发育控制系统关闭？抑或一直持续表达？

pridevil

9 u7 k- B# D2 c) o% t) z. F
) y* h8 X4 o; }“iPS形成之后，逆转录病毒载体使4个转基因沉默（与在小鼠系统中的发现一样），这说明iPS细胞完全重新编程，不再依赖于转基因的表达”& a$ Y% [/ Q! m; Q* o5 ^
原话：“The four retroviruses are! T8 ]; M8 `3 V6 e' F
strongly silenced in human iPS cells, indicating that these, Q8 H3 X* b8 I; ~3 i" i3 _8 q7 t
cells are efficiently reprogrammed and do not depend on/ g) h# z- @1 R( b7 J9 W/ Q4 E+ f
continuous expression of the transgenes for self renewal.”
9 \7 u5 p. e  `% \5 ?/ S: C8 L文章：Induction of Pluripotent Stem Cells from Adult Human Fibroblasts0 N: G; R& [. e2 m
by Defined Factors   DOI 10.1016/j.cell.2007.11.019: |. p5 @' G. M* n0 b: O
; i8 w+ m3 l0 p/ Q: S! m
这句话 出自此文 DISCUSSION 部分的 第三句话:lol; i: D3 u4 V0 c5 M0 p% z
原文附上7 b; J& D, e: p- H- M

pridevil

这篇文章的讨论部分分析的很详细，希望你能从中找到想要的答案！
: C4 O: r, ^# ~- v/ Q* MGL

pridevil

这篇文章的讨论部分分析的很详细，希望你能从中找到想要的答案！1 R: g$ D0 g& q) B
GL

ghfvcat

回复 2# pridevil
9 z0 a1 B, n* g$ @* E; G' n0 [+ E7 F( T
  v; a% j( J/ F' a3 M" `
5 Q( W+ W+ ^3 x2 [) C" S( C    多谢版主！

gemstone

iPS一般如果是完全编程的话，外源基因是要沉默的，如果没有沉默，说明还不是完全编程，或者处于过度阶段。

张也行

对啊，iPS细胞的外源基因如果不沉默，那么细胞就没办法分化了。至于怎么沉默的，好像文献很少提，我感觉应该跟ES细胞的机制差不多吧——细胞选择性的基因沉默，然后分化。

ghfvcat

回复 7# 张也行
0 k0 I9 {  @1 L; }! ]. C问题在于，细胞那一套固有的调节机制对于外源插入的病毒有没有作用？

张也行

回复 8# ghfvcat
5 e3 H4 ~, d9 m有作用啊。文献不是说被沉默了吗？那说明有效啊。再说导入的外源基因不是人的吗？那么细胞里的甲基化酶类等对它们应该是有效的。