IPS分化时要不要沉默掉前期导入的外源转录因子？

ghfvcat

请问大家在做IPS的时候，做到后面分化时要不要沉默掉前期导入的外源转录因子?
  P: }! u2 S" Q) A+ r! Q2 O我在一篇中文的文章上看到这么一句话，在人iPS形成之后，逆转录病毒载体使4个转基因沉默（与在小鼠系统中的发现一样），这说明iPS细胞完全重新编程，不再依赖于转基因的表达，请问有人知道这句话的原来的出处在哪儿么？ 9 O2 Z: Y$ G* _$ U+ A/ `5 J  b/ _
iPS细胞完全重新编程，不再依赖于转基因的表达，这我可以理解，但是导进去的外源转录因子会在IPS形成之后自动沉默么？还是会在随之而来的分化中由细胞的发育控制系统关闭？抑或一直持续表达？

pridevil

) a6 y" p4 D( Y3 R$ Q1 Q; Q
. y3 y5 a: U3 U
“iPS形成之后，逆转录病毒载体使4个转基因沉默（与在小鼠系统中的发现一样），这说明iPS细胞完全重新编程，不再依赖于转基因的表达”! r  R5 C& d, T. u+ e& L
原话：“The four retroviruses are
  z+ l: ?: ]) E% [, u: m/ q' |strongly silenced in human iPS cells, indicating that these- S. W" ~: H+ a
cells are efficiently reprogrammed and do not depend on; v# t% G9 J; \  E; l4 C
continuous expression of the transgenes for self renewal.”
. E. \, Q2 L+ o. r4 t- e& O' P0 i文章：Induction of Pluripotent Stem Cells from Adult Human Fibroblasts& U8 a$ r# W9 d
by Defined Factors   DOI 10.1016/j.cell.2007.11.0192 F0 ^$ Z6 M8 o
4 M0 _- T* s/ z1 P
这句话 出自此文 DISCUSSION 部分的 第三句话:lol
  X5 M1 i& M3 s  {* H$ D原文附上
( Z/ i" L, C  g% s

pridevil

这篇文章的讨论部分分析的很详细，希望你能从中找到想要的答案！
1 n4 O7 h( }5 ^5 A. WGL

pridevil

这篇文章的讨论部分分析的很详细，希望你能从中找到想要的答案！$ h" s1 ]6 p* a5 m5 J
GL

ghfvcat

回复 2# pridevil + a* _# d: j, H2 A; R

. X2 R5 l. C5 p6 X* s# F2 G9 ?/ |
; ~( ~* V# ^6 c! {    多谢版主！

gemstone

iPS一般如果是完全编程的话，外源基因是要沉默的，如果没有沉默，说明还不是完全编程，或者处于过度阶段。

张也行

对啊，iPS细胞的外源基因如果不沉默，那么细胞就没办法分化了。至于怎么沉默的，好像文献很少提，我感觉应该跟ES细胞的机制差不多吧——细胞选择性的基因沉默，然后分化。

ghfvcat

回复 7# 张也行
; {' S2 G" b- {5 B! }) Y- y问题在于，细胞那一套固有的调节机制对于外源插入的病毒有没有作用？

张也行

回复 8# ghfvcat 1 h$ S( y% H. S; R) B
有作用啊。文献不是说被沉默了吗？那说明有效啊。再说导入的外源基因不是人的吗？那么细胞里的甲基化酶类等对它们应该是有效的。