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293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。
W# f0 M9 o! Z" ]$ s8 Y6 U7 A2 O1 ?5 _( S7 B
& A( P3 {- a+ T) Y
4 R9 s( Y" s0 H, r% U& B% V4 l
" o2 X: v% V% E其生长特性为： 3 m' k, i9 j5 m# Q O
粘附
5 q4 e G D, M3 S4 E 文献评价 293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。[RF32725]
4 _, z* P# G& q4 @ 表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]
( N) L* }0 y1 ]2 ?9 d3 f 早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]7 y: k! g P) w" A3 S( q
此细胞系人腺病毒滴度高。# E! I8 M8 ~% b3 v5 U4 H
室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。& o7 Z6 [9 u# d+ k' p3 ~
表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793]
6 N+ ]- T" ?& R# L: ?$ z) | The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
' Q2 H3 Y+ X$ { _9 `, ]$ l- @: Q 传代 293:弃培养基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。
0 O+ Q; r0 C3 H, l4 ~% Y/ ^ 加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。
) ~5 J) Y& K' K8 k- r5 K 293T:生长快，通常倍增时间不到一天 。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。! G! y0 ?% }6 U; Y. i- \ J) v5 d5 S
培养基更换 每2-3天一次
2 j. y7 o+ E% {# N 冻存液 95%培养基；5%,DMSO；culture medium 95%; DMSO, 5%；5 @: l, V# `9 ?/ i! L1 J/ u
培养条件 ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清2 N5 C6 R; H; t
37℃培养 |
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发表于 2010-1-24 21:49
发表于 2010-1-24 22:36
