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293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。
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8 |3 ~8 v( I1 K6 C
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0 L; [) c+ \" j, v& i3 I其生长特性为： * w+ i- l" M* X8 ~
粘附
5 x( u; ]- d3 @, V, k' v9 w4 f 文献评价 293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。[RF32725]
( J4 b S0 A ^* f# u( W 表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]" n5 ^6 F( H8 ]; Y$ W
早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]
: a1 G! m3 I: P t$ W% o8 d. S* | t' v 此细胞系人腺病毒滴度高。
4 V1 U5 _+ v9 C2 ]+ D: h 室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。3 J p2 R: y k& N1 Z% d% N; x
表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793]
+ e' d6 u; _$ u. h( F" i, Q* Q The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
3 w8 }6 B% j5 s 传代 293:弃培养基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。( r4 b1 D+ s: R3 r. T# @& ]0 g+ W
加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。3 _( b& f5 d. T, t# t$ z8 x& T# m
293T:生长快，通常倍增时间不到一天 。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。2 l) ?2 ~* Y/ r9 u7 u5 }) o+ _' q- z! s
培养基更换 每2-3天一次
4 {! q1 k) Z" H3 W( ? 冻存液 95%培养基；5%,DMSO；culture medium 95%; DMSO, 5%；
. L* [* e% s5 m 培养条件 ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清8 t( N! j7 m7 H, S0 P; B
37℃培养 |
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发表于 2010-1-24 21:49
发表于 2010-1-24 22:36
