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ahfjwangrui

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楼主

发表于 2010-1-26 21:41 |只看该作者 |正序浏览 |打印

请教各位专家一个问题，在将四种转录因子导入成熟细胞时，是用在一个载体上连接四种因子的基因片段，还是一个因子一个载体，
如果是前者，插入的片段会不会超过有些载体的负荷，
如果是后者，如本人用慢病毒载体，会不会各个因子载体在整合进宿主细胞时，发生竞争抑制呢？) S: G3 F- X& |+ w W
谢谢！

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13楼

发表于 2010-3-5 12:57 |只看该作者

单独转和一起转都有人做过，单独转因为要四个基因一起转进去所以效率很低，然后就有人想到放在一个载体上了

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jimzhua

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12楼

发表于 2010-2-15 18:53 |只看该作者

回复 1# ahfjwangrui
. X, i1 h3 }8 t: e4 G' G7 M$ b
现在可以买到已连好的病毒质粒 addgene

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baichunyu

版主

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11楼

发表于 2010-2-3 21:40 |只看该作者

应该是根据片段大小选择是否选择一个或多个载体

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tieyun

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10楼

发表于 2010-2-2 21:19 |只看该作者

有没有文章比较过单独转和整体转的差异啊？谢谢~~

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decloud2009

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9楼

发表于 2010-1-30 01:51 |只看该作者

楼上讲得很有道理，，

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feifa1314

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8楼

发表于 2010-1-29 09:37 |只看该作者

问题是这四个因子进入细胞后，翻译出来的蛋白量难以估计，也就存在四个因子之间的平衡问题；
分开包装的话，可以控制相应的病毒量，使得四个因子的病毒量有个大致的平衡。1 S; r, f/ O8 ]* X+ _
我觉得，这四个因子之间肯定存在一个平衡态，达到平衡台的话，就会启动细胞从普通细胞向胚胎干细胞的质的转变。否则，就难以启动，或者说，即使启动了也不能完全。