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要注意的问题很多啊。。
' b3 M& A' E3 a7 V9 F3 U第一:转染试剂的选择(现在最常用的应该就是Lipo2000;当然,如果是电转或者其他方法就另说了)不同的转染试剂的转染效率和要求是不一样的,比如转染前培养液中是否可以含有双抗等。也可以视你的实验要求,选择特定的转染试剂
5 R. B9 z% @- d- z. g第二:转染时对照的设定,转染是一种可以拿到直接数据的实验,所以对照的设定必须严格,我一般设阴性,阳性和空白对照,这也是要视具体实验而定的5 v; q9 e+ _0 d/ D. y( g
第三:转染条件的摸索,转染试剂说明书上给定的条件不一定适合你的实验,所以实验前一般要自己摸条件,找出最佳转染条件,这个是必须的, q; P1 T% a, H0 i4 j
第四:污染的控制,这个无需多言,细胞实验都是要注意的,但转染更应注意,原因很简单,试剂很贵,因为这个影响了结果的话,冤死。9 r' A( H( v, p3 c7 [. S
2 Z3 g+ f4 B- L7 m9 Q/ V大概就这些吧,其他的可能还有一些细节,想起来了再补充,希望对你有帮助 |
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