IPS细胞的获取方面的问题？

ahfjwangrui

现在我开始准备着手做这方面的课题，但遇到以下问题：1.在做诱导人的体细胞向IPS细胞转化时，为何要用到MEF细胞，这好像是鼠源性的啊! ^" H& B8 ]$ H. I& X
2.在做四种逆转录病毒因子转染时，一定要有用逆转录病毒转染培养基吗？这种逆转录病毒培养基可以买到吗？/ v& F& x. F$ Z3 |/ P2 e1 l. ?3 F
最后，想认识一位正在做向ips细胞诱导转化的朋友，我的QQ号是158040891！

hansey

简单的说：1.因为MEFs可以分泌一些维持hESCs生长所必须的因子
0 q5 W6 Q) b$ a0 m% `6 Y( A2.不是很清楚你说的逆转录病毒转染培养基是什么意思，是病毒毒液还是培养基呢？

ahfjwangrui

那个MEFC是不是要经过什么特殊处理呢？

hansey

回复 3# ahfjwangrui
3 T4 c6 K/ C: u! w+ A
6 G$ N* N/ h) r; B得用放射性元素照射后让其停止生长后才能用的

hansey

回复 3# ahfjwangrui ( j$ m  W; P  m9 k+ ]- ?9 \7 D

2 b2 D$ a( A$ u. ^6 w7 m或者是用丝裂霉素处理，总之是使其不再增殖

ahfjwangrui

兄弟，能否发一个相关的protocol给我看看！谢谢

上海过客

搜索啊 ，饲养层  制备 。  一大堆的  资料 。 本论坛 也很多 。

hansey

回复 6# ahfjwangrui ' N" A9 i0 ], |  o
9 r7 P( n9 J5 m# [' W) y3 v
这个你很容易就会搜到的啊，制备滋养层细胞是做干细胞最基本的东西

ghfvcat

逆转录病毒转染培养基，我没理解错的话，你说的就是把逆转录病毒添加到IPS的常规培养基里所形成的。
' x+ h/ ~5 O+ |' {+ S至于饲养细胞，你有人源的当然更好，问题是你有么？总不能去弄人胚吧，鼠源的也能用了，一些生长因子差不多。  k6 D8 {" e/ `, c# M) ?# t' p
我也准备弄这个呢，多多交流～

ghfvcat

逆转录病毒转染培养基，我没理解错的话，你说的就是把逆转录病毒添加到IPS的常规培养基里所形成的。: }2 K9 r& K0 Z2 ?) F4 U
至于饲养细胞，你有人源的当然更好，问题是你有么？总不能去弄人胚吧，鼠源的也能用了，一些生长因子差不多。
# v  Y$ R8 h& w! I0 w5 G& z我也准备弄这个呢，多多交流～