干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

注册

找回密码

 

 

搜索
干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 › 干细胞之家论坛 › 干细胞实验室技术交流 › 胚胎干细胞专区 › 大家谈谈你们是怎么培养ES细胞的？
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: runner
go

大家谈谈你们是怎么培养ES细胞的？   [复制链接]

开心果王

Rank: 3Rank: 3

积分
450 
威望
450  
包包
3393  

优秀会员 积极份子 小小研究员 热心会员

7楼
发表于 2010-3-12 21:47 |只看该作者
可以根据细胞的生长情况来决定哦，向ES这些都是比较娇贵的细胞，应该用低浓度的胰酶/EDTA（0.05%）来消化，时间不要太长，1min左右！显微镜下观察，大部分消化下来即可，终止的时候用培养液轻轻吹吹即可！
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 10   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

wuhonglian2008

Rank: 1

积分
22 
威望
22  
包包
31  
地板
发表于 2010-3-11 13:49 |只看该作者
我个人养ESC也是每天都换液的，但MEF一般两天换一次依情况而定，消化我一般放在培养箱2分钟拿出来看看，根据具体情况在决定是终止还是继续消化！
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 10   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

chendongbo338

Rank: 2

积分
184 
威望
184  
包包
10  
报纸
发表于 2010-3-10 16:44 |只看该作者
你们细胞如果消化5分钟，细胞状态还好吗？
  A, V- _5 S! X1 H+ O7 P1 A" ^我消化R1细胞一般只有在室温消化1分钟，细胞开始脱落，没必要那样死板，消化的过程中可以看一下细胞是否脱落，再决定是否继续消化，最好在消化前用PBS洗两遍
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 10   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

czzhaozhu

Rank: 3Rank: 3

积分
403 
威望
403  
包包
928  

优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2010-3-10 10:49 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
从我培养mES细胞和hES细胞的一点经验来看，还是每天换液对细胞的生长状态好，最好每天都在固定的时间换；至于消化时间倒不是非要5分钟不可，只要细胞从皿底大部分脱落下来即可。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

BenHantun

Rank: 2

积分
249 
威望
249  
包包
706  

优秀会员

藤椅
发表于 2010-3-9 21:54 |只看该作者
我觉得培养ESC，勤换液还是比较好的，但是消化细胞，还是自己掌握时间吧，只要镜子下看到绝大部分细胞消化下去就可以了，消化时间长反而对细胞不好！
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

decloud2009

Rank: 3Rank: 3

积分
805 
威望
805  
包包
1486  

精华勋章 积极份子 优秀会员 博览群书 美女研究员 新闻小组成员

沙发
发表于 2010-3-9 15:54 |只看该作者
隔天换液可以的，，消化也不一定要5 分钟。只要看到脱落了，镜下也脱落下来就可以了阿 。干吗一定要这么死啊。。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

回复 引用

举报 返回顶部

‹ 上一主题|下一主题 ›
12
返回列表 发新帖 回复
高级模式 | 发表帖子
B Color Image Link Quote Code Smilies
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-29 01:44

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.