关于脐带消化的问题

zhujiang007

大家都用的什么酶来消化脐带啊？如何建立脐带量和酶量的关系？

wuxiao101325

回复 西瓜太郎 的帖子2 Q. Q7 c* N$ |/ Q$ E
" S' B5 d8 X4 _& Z7 c
还有一种粗放的做法是直接倒掉，但要注意酒精灯烧瓶口或消毒酒精擦拭瓶口防止染菌

xuehu20

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7 v" Y+ d5 x* }. i  o. g  M& G- c8 Z( Q) d  x8 _3 c9 @- D- H# c
把移液管细头一侧掰断，酒精灯前灼烧使管口圆润，然后吸取组织块，第一次换液要轻柔点，等细胞长出来后就可以拍打培养瓶，把剩余组织块去除了

sign_huhu

回复 西瓜太郎 的帖子$ ~" B9 Y% \) ^" ?: O5 Q
, ^+ Z# W0 Y" N. f
你可以把移液管掰断 用大口吸   V$ l# W( `- T/ s. s% L/ \

西瓜太郎

回复 wuxiao101325 的帖子; t: ^- `& W) ~. g& T: T% c
/ E8 Z& ^0 A, }, w  S* [! O% z
4 将含组织块的消化液，转移到25cm2细胞培养瓶中，加入DMEM/F12(Gibco,cat no 12400-024)培养基（含15%胎牛血清Gibco, Ref 10099-141），37℃、5%CO2孵箱培养；
/ m% `. {4 J/ }' k 弱弱的问下，你的组织块怎么从培养瓶中去除啊？

wuxiao101325

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7 p- H4 T& D% b; ?+ l0 N. E) j; S) ]; r) L+ V4 V
0.5%胰酶2ml+400~800U/ml胶原酶2ml

清影

最近做脐带间充质干细胞收率不高，而且细胞很杂，原代贴壁不好。各位有没有做的比较成熟的哈，指导一下。

文武庙

好东东，mark一下！

西瓜太郎

回复 wuxiao101325 的帖子4 b' D9 z& N' u8 w7 i6 O. L

, R9 b  R3 L) z. S就是4ml=0.25%的胰酶2ml+200/400U 胶原酶II 2ml？是么 ？* @, ?* v' |* b* O8 X' |: z) h

wuxiao101325

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# n7 y' p0 L8 p6 H( ~2 Y
5 q+ I3 e% J  l$ L分别用PBS配置2*的胰酶及胶原酶，用时等体积混合即可