关于脐带消化的问题

zhujiang007

大家都用的什么酶来消化脐带啊？如何建立脐带量和酶量的关系？

wuxiao101325

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# ?; @. _1 ?# q还有一种粗放的做法是直接倒掉，但要注意酒精灯烧瓶口或消毒酒精擦拭瓶口防止染菌

xuehu20

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6 i  B0 x1 A4 \1 h' Y: {+ f: M) p+ f# \$ U4 ?+ H$ }
把移液管细头一侧掰断，酒精灯前灼烧使管口圆润，然后吸取组织块，第一次换液要轻柔点，等细胞长出来后就可以拍打培养瓶，把剩余组织块去除了

sign_huhu

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7 I  H- s5 ?  Q' E4 H: T你可以把移液管掰断 用大口吸
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西瓜太郎

回复 wuxiao101325 的帖子- d& h4 _( [$ G8 C6 q' ?. Q
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4 将含组织块的消化液，转移到25cm2细胞培养瓶中，加入DMEM/F12(Gibco,cat no 12400-024)培养基（含15%胎牛血清Gibco, Ref 10099-141），37℃、5%CO2孵箱培养；   ]/ h( A8 u; H, u7 L- p. Y
弱弱的问下，你的组织块怎么从培养瓶中去除啊？

wuxiao101325

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' I1 b) q: B5 ?# X6 F! f8 u& W6 b* d5 J4 I% s9 B, t) }& z- U% ^& w
0.5%胰酶2ml+400~800U/ml胶原酶2ml

清影

最近做脐带间充质干细胞收率不高，而且细胞很杂，原代贴壁不好。各位有没有做的比较成熟的哈，指导一下。

文武庙

好东东，mark一下！

西瓜太郎

回复 wuxiao101325 的帖子1 D3 V9 W* ^9 R: {1 x

- }8 ~' `- d: {3 C就是4ml=0.25%的胰酶2ml+200/400U 胶原酶II 2ml？是么 ？8 e! n& `) D9 s) J

wuxiao101325

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2 c7 M, K1 s- m; T8 p/ O$ F
* g. m  o" C. {, C+ M+ ^% I- \分别用PBS配置2*的胰酶及胶原酶，用时等体积混合即可