如何将胚胎干细胞和支持他生长的饲养层分离开来？

mominglily

对胚胎干细胞做毒性测试，怎样将胚胎干细胞和支持他的饲养层细胞分开，以使加到96孔板中的细胞是纯粹的胚胎干细胞而不夹杂较多的饲养层细胞？
# c8 K) K/ l. P请教各位，谢谢！

mominglily

万分感谢，我先下载来学习下，但是目前我们在做的是含有饲养层的mES细胞，就想寻找针对有饲养层细胞的方法。

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回复 5# czzhaozhu
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' y! N. J: c" C+ m    谢谢您！我自己也打算用这种方法来做，但是是否必须选用和原板面积一样大的板来爬呢？用较小一点的面积的板可以吗？！~还有就是爬的时候需要加凝胶铺板还是空板？因为有人说使用空板来爬，谢谢！~

mominglily

回复 12# zpzp0312
0 h% D4 U3 b" J# ?4 Y+ T* l5 \& }0 r- w1 W/ e+ @  [8 X4 h: |
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    请问怎么挑取单个集落啊？从来没试过勒，请教下！谢谢！

mominglily

回复 11# starlight 9 g# a" W2 M: u5 ^0 m" A0 ~

) g* Z& R6 d) z* C+ _. W嗯，也有考虑过用无饲养层培养的方法，但目前仍限于用有饲养层的培养方法。
3 A# B, s/ s& `+ s还有就是延长沉降时间，具体需要延长多久呢，我担心沉降久了mES细胞也会贴壁了，那样的话将会损失不少干细胞呢！

mominglily

回复 10# 可怜的孩子 . ^& u7 b2 Q8 R# |9 g9 [
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    对，是丝裂霉素处理过后的MEF，且是已经支持mES细胞生长以后的MEF，在mES传代或冻存或者用mES细胞来做MTT试验需要对mES细胞计数埋板时，想把原来支持mES生长的feeder去除掉，这样埋板时的mES细胞就会比较纯粹一点。

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回复 20# 上海过客
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% R. v+ B, D# L) J& P  b( N    那么请问用什么工具来挑呢？没做过，所以很懵！谢谢指导！