如何将胚胎干细胞和支持他生长的饲养层分离开来？

mominglily

对胚胎干细胞做毒性测试，怎样将胚胎干细胞和支持他的饲养层细胞分开，以使加到96孔板中的细胞是纯粹的胚胎干细胞而不夹杂较多的饲养层细胞？7 l* R3 _" l( X7 U) v: w5 ~( D
请教各位，谢谢！

mominglily

万分感谢，我先下载来学习下，但是目前我们在做的是含有饲养层的mES细胞，就想寻找针对有饲养层细胞的方法。

mominglily

回复 5# czzhaozhu : X  [  G% {8 e

  [9 M' N. ?- o0 M, a. c5 V- ^
  {, n# A. T, B+ @    谢谢您！我自己也打算用这种方法来做，但是是否必须选用和原板面积一样大的板来爬呢？用较小一点的面积的板可以吗？！~还有就是爬的时候需要加凝胶铺板还是空板？因为有人说使用空板来爬，谢谢！~

mominglily

回复 12# zpzp0312 / u8 K; R! A* C# x# |0 Z

5 k  b! m5 U/ j/ m8 @/ H
+ g" g2 |2 c1 p9 j( Q+ U/ C    请问怎么挑取单个集落啊？从来没试过勒，请教下！谢谢！

mominglily

回复 11# starlight
5 @: c" G* P( S7 i; Y4 Y% a4 ^) C
. k0 \$ H2 b8 g9 B* \' O嗯，也有考虑过用无饲养层培养的方法，但目前仍限于用有饲养层的培养方法。( U( N# _! @0 o6 r
还有就是延长沉降时间，具体需要延长多久呢，我担心沉降久了mES细胞也会贴壁了，那样的话将会损失不少干细胞呢！

mominglily

回复 10# 可怜的孩子
  R6 C# b+ G; W; K! I! r
  H# S& k- M% P) S9 {/ y  D( j# o! D/ l
    对，是丝裂霉素处理过后的MEF，且是已经支持mES细胞生长以后的MEF，在mES传代或冻存或者用mES细胞来做MTT试验需要对mES细胞计数埋板时，想把原来支持mES生长的feeder去除掉，这样埋板时的mES细胞就会比较纯粹一点。

mominglily

回复 20# 上海过客 . H( M* J5 S- ?
# P9 H! z5 }' V6 f: e5 p0 j

4 U9 ]0 @0 d! z    那么请问用什么工具来挑呢？没做过，所以很懵！谢谢指导！