如何将胚胎干细胞和支持他生长的饲养层分离开来？

mominglily

对胚胎干细胞做毒性测试，怎样将胚胎干细胞和支持他的饲养层细胞分开，以使加到96孔板中的细胞是纯粹的胚胎干细胞而不夹杂较多的饲养层细胞？/ @" h, H! M. w8 k$ h; L  G
请教各位，谢谢！

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万分感谢，我先下载来学习下，但是目前我们在做的是含有饲养层的mES细胞，就想寻找针对有饲养层细胞的方法。

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回复 5# czzhaozhu
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. q# d- i. {9 I    谢谢您！我自己也打算用这种方法来做，但是是否必须选用和原板面积一样大的板来爬呢？用较小一点的面积的板可以吗？！~还有就是爬的时候需要加凝胶铺板还是空板？因为有人说使用空板来爬，谢谢！~

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回复 12# zpzp0312   ~5 H$ R3 q  G% V' E/ u
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    请问怎么挑取单个集落啊？从来没试过勒，请教下！谢谢！

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回复 11# starlight - k& a% i" N8 n& h6 M1 T6 W0 J) u2 _* K
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嗯，也有考虑过用无饲养层培养的方法，但目前仍限于用有饲养层的培养方法。
) T" R8 L& x3 Q; d还有就是延长沉降时间，具体需要延长多久呢，我担心沉降久了mES细胞也会贴壁了，那样的话将会损失不少干细胞呢！

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回复 10# 可怜的孩子
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* H! g8 e9 Q. I, X( b
! z+ @, ?8 e) x$ ]: C1 I    对，是丝裂霉素处理过后的MEF，且是已经支持mES细胞生长以后的MEF，在mES传代或冻存或者用mES细胞来做MTT试验需要对mES细胞计数埋板时，想把原来支持mES生长的feeder去除掉，这样埋板时的mES细胞就会比较纯粹一点。

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回复 20# 上海过客
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* S! _5 m5 m/ ^: R    那么请问用什么工具来挑呢？没做过，所以很懵！谢谢指导！