MSCs为什么一个星期也长不到80%

helen841102

请问 我养的MSCs为什么一个星期也长不到80%，之后细胞就出现老化现象，我用的培养基是10%小牛血清的L-DMEM

angel-sakura

你的是原代还是传代？

yuheng

细胞营养不够，建议改用胎牛血清

helen841102

谢谢  我的细胞是原代  除了血清的问题 是不是用进口的塑料瓶或者铺着明胶的玻璃瓶比较好呢？另外，我想要全骨髓培养法，用更换培养基的方法去除杂质细胞，请问在什么时间更换培养基比较好？24h,48h,之后3天？

凤仪飘雪

最好用塑料瓶，我们用的就是corning的，我也采用全骨髓培养法，一般在48小时后半量换液，再过48h全量换液，以后就可以3天换一次液了。
% d: e$ S2 s6 ]- E! I* K$ G& e8 z另外我想问问你采用的全骨髓法是不是将采来的骨髓不经离心分离全部加入培养瓶进行原代培养？谢谢

色色兔

采用全骨髓培养要用胎牛血清，我用的a-MEM培养基。48小时后全换液。

色色兔

我上次养的细胞到4代5代的时候就老化了。然后扔掉了。上周杀的老鼠，4.12。到今天4.19细胞也没有长满，而且细胞也老化了。上次用的是胎牛的血清，这次是小牛，我觉得也是血清营养不够。

烂桃

我用DMEM\F-12，原代15%FBS，传代10%FBS，1%双抗，其他什么都不用加就可以长得很好，两三天换一次液，血细胞多的话可以用PBS洗一次，基本一个星期长满，传代的话一传二两三天就长满了，一传三要四五天

missyoudad

请问楼上传代时消化用的胰酶浓度？时间？

angel-sakura

回复 5# 凤仪飘雪 $ N; z9 a" H# o% z# X; [" v
如果你是用PBS冲细胞的话就要离心，我是直接用培养基冲，所以不离心