我的MSC容易分化如何解决？

mag2722

为什么我的SD大鼠的MSC很容易变成扁扁的，多角形的，还有各种形态的  
8 e, ]$ T' X- v1 w我用hyclone的L-DMEM，10%的FBS ，另外加双抗，谷氨酰胺

待鹤

1.传代密度不要太小
' }/ f' q9 ?1 w! M5 ~0 M- B* g2在细胞长至80%汇合时传代，不要等到长的很满，这是很多细胞已经停止分裂进入分化阶段。
% ]0 C) l. k/ j3.可以尝试加些生长因子如bFGF、EGF、PDGF、VEGF等。
4 [. w: p  n/ B' G2 O% g8 t' g4.注意有没有污染。

realinter

血清质量也会有关系，同楼上的建议加bFGF试试

mag2722

OK
6 y2 u+ t9 l' x8 N: }谢谢" \# h1 z' s6 i1 V: d
尝试一下

askage

血清浓度可以降低点，7.5%，5%可以试试，我用的澳FBS.有人说高糖，高血清都易分化。一个姐们养胚胎干的，据她说在血清培养基中，她们的胚胎干可以分化成N多类细胞（未诱导）。/ {) R6 l. ?! V8 w# _
另外感觉您老养的细胞像是要死了

kiesheep

回复 2# 待鹤
8 q2 U, a! U& h5 I' Z- K2 F+ w# B  D1 w7 Q8 N0 h
污染也会导致分化？2 Z/ W8 ~: n, F- Z; i6 C
是不是有些污染在显微镜下会看不见的？

aphple85

回复 2# 待鹤 $ |6 f8 n/ X9 v

. d$ ]' I" v) o- p, Z* x4 d, R! R
    你好，请问一下培养基的PH值增高会不会引起BMSC的分化，谢谢！呵呵

待鹤

回复 7# aphple85
, K9 j0 T: T2 |# {9 p/ n* \
  m- I7 d1 L1 \, }0 C
( y- m; T; a$ x# a% {; U2 R  U    也会的，MSC的最适pH是偏酸的，这也是值得注意的一个问题。

待鹤

回复 6# kiesheep
0 s* {1 }  U# f2 v) @
# j, i. t4 ?5 M+ O( Y/ E污染导致细胞增殖缓慢，引起细胞死亡，干性渐失，就容易分化了。

烂桃

我用15%的FBS养都没问题，不过我做过L-DMEM与F-12比较，前者高血清条件下易变圆，我觉得你这细胞比较像污染快要破碎或者快死掉了