我的MSC容易分化如何解决？

mag2722

为什么我的SD大鼠的MSC很容易变成扁扁的，多角形的，还有各种形态的  
. C; F+ q: U& \7 n* w我用hyclone的L-DMEM，10%的FBS ，另外加双抗，谷氨酰胺

待鹤

1.传代密度不要太小
; C$ W& O0 o. n3 Y6 `: U2在细胞长至80%汇合时传代，不要等到长的很满，这是很多细胞已经停止分裂进入分化阶段。. {9 Q3 U/ J8 |2 G! O' f( \
3.可以尝试加些生长因子如bFGF、EGF、PDGF、VEGF等。7 v3 w" c0 s6 p0 [/ ]$ {3 X) B' w
4.注意有没有污染。

realinter

血清质量也会有关系，同楼上的建议加bFGF试试

mag2722

OK
# W( c1 a) F5 U# j. U8 v谢谢5 p  h( Y+ N7 ?0 Z( ]. h
尝试一下

askage

血清浓度可以降低点，7.5%，5%可以试试，我用的澳FBS.有人说高糖，高血清都易分化。一个姐们养胚胎干的，据她说在血清培养基中，她们的胚胎干可以分化成N多类细胞（未诱导）。
9 _' w2 x2 b: e9 x另外感觉您老养的细胞像是要死了

kiesheep

回复 2# 待鹤 & g6 k+ X8 e0 n- w& m
" h# w' _6 E3 M$ H/ f
污染也会导致分化？
/ u5 M  Z- U  |: a0 p9 |是不是有些污染在显微镜下会看不见的？

aphple85

回复 2# 待鹤 * ]/ e, N6 a! D, `  g" |

2 G( S; B/ ~% h7 U& M. H# }8 }( _$ I5 S% F- t' D, t' |0 N0 F
    你好，请问一下培养基的PH值增高会不会引起BMSC的分化，谢谢！呵呵

待鹤

回复 7# aphple85   w8 a6 J6 W5 T# r; e1 l

3 q" E* \" O5 C3 E3 V! _4 N
9 T; N& r+ Z/ N+ o8 J    也会的，MSC的最适pH是偏酸的，这也是值得注意的一个问题。

待鹤

回复 6# kiesheep
; R! I6 D  v8 r9 M7 X# G1 Y# K) \# t/ r
污染导致细胞增殖缓慢，引起细胞死亡，干性渐失，就容易分化了。

烂桃

我用15%的FBS养都没问题，不过我做过L-DMEM与F-12比较，前者高血清条件下易变圆，我觉得你这细胞比较像污染快要破碎或者快死掉了