我的MSC容易分化如何解决？

mag2722

为什么我的SD大鼠的MSC很容易变成扁扁的，多角形的，还有各种形态的  ' G! t/ X8 B" h9 D3 x
我用hyclone的L-DMEM，10%的FBS ，另外加双抗，谷氨酰胺

待鹤

1.传代密度不要太小3 a+ |: ~& C+ O: l8 v
2在细胞长至80%汇合时传代，不要等到长的很满，这是很多细胞已经停止分裂进入分化阶段。
3 j8 x) V. G# ~/ ^3.可以尝试加些生长因子如bFGF、EGF、PDGF、VEGF等。1 a3 O4 ?( \5 N; M: P0 c4 ^
4.注意有没有污染。

realinter

血清质量也会有关系，同楼上的建议加bFGF试试

mag2722

OK+ J9 W9 i! I( x  N7 d
谢谢
, ]3 e5 s" ?' e7 x尝试一下

askage

血清浓度可以降低点，7.5%，5%可以试试，我用的澳FBS.有人说高糖，高血清都易分化。一个姐们养胚胎干的，据她说在血清培养基中，她们的胚胎干可以分化成N多类细胞（未诱导）。
6 L5 G# P, x3 a6 U9 ]% i- U# M另外感觉您老养的细胞像是要死了

kiesheep

回复 2# 待鹤 / x' q; C$ o/ }( x( {: e
* w6 c$ w+ m! C( m$ n
污染也会导致分化？
$ a( [" ]8 g5 d' w  G: b& ^是不是有些污染在显微镜下会看不见的？

aphple85

回复 2# 待鹤
9 J4 `' W7 R' g! ^0 R" \* p6 x) [2 ?# t* \# ~
3 i) L- ]* B  m6 o: v, \# O! f
    你好，请问一下培养基的PH值增高会不会引起BMSC的分化，谢谢！呵呵

待鹤

回复 7# aphple85
" U2 C7 z% Y& t/ {- K  [+ m( ^
9 L" A6 z2 A1 |5 d$ s4 w, y% C. _) V' z6 V
    也会的，MSC的最适pH是偏酸的，这也是值得注意的一个问题。

待鹤

回复 6# kiesheep 8 ]$ b. u( R* a! M; m( C

. c& c0 o8 _$ e) s+ [: d污染导致细胞增殖缓慢，引起细胞死亡，干性渐失，就容易分化了。

烂桃

我用15%的FBS养都没问题，不过我做过L-DMEM与F-12比较，前者高血清条件下易变圆，我觉得你这细胞比较像污染快要破碎或者快死掉了