我的MSC容易分化如何解决？

mag2722

为什么我的SD大鼠的MSC很容易变成扁扁的，多角形的，还有各种形态的  
8 |6 g. x0 @& b3 }( @我用hyclone的L-DMEM，10%的FBS ，另外加双抗，谷氨酰胺

待鹤

1.传代密度不要太小  z& f# q8 r, s8 k
2在细胞长至80%汇合时传代，不要等到长的很满，这是很多细胞已经停止分裂进入分化阶段。/ [+ s) O- }. @+ M
3.可以尝试加些生长因子如bFGF、EGF、PDGF、VEGF等。" @1 A4 E& A% ~& D
4.注意有没有污染。

realinter

血清质量也会有关系，同楼上的建议加bFGF试试

mag2722

OK
9 s6 N/ _6 Z2 F6 i( w6 d; X谢谢
, p; `0 [$ J6 F) a: w5 h尝试一下

askage

血清浓度可以降低点，7.5%，5%可以试试，我用的澳FBS.有人说高糖，高血清都易分化。一个姐们养胚胎干的，据她说在血清培养基中，她们的胚胎干可以分化成N多类细胞（未诱导）。
+ {5 s6 N3 Q2 q* Z另外感觉您老养的细胞像是要死了

kiesheep

回复 2# 待鹤 # w# q: R/ _7 i: g1 w

. l. i# j  a8 B  B污染也会导致分化？
# Z- I; q/ D. X. c9 ]3 r是不是有些污染在显微镜下会看不见的？

aphple85

回复 2# 待鹤 4 a) H; [/ c% r5 f! h  \

0 U5 b. D0 ~6 l, Z/ c! s( \. h$ G$ `1 S
    你好，请问一下培养基的PH值增高会不会引起BMSC的分化，谢谢！呵呵

待鹤

回复 7# aphple85 & w, m, I; h, V8 k6 E' j
+ @/ ?2 j; T0 d/ I$ ~9 y) W; J8 _2 p

" f0 I( S- E4 H% f4 g0 v* g    也会的，MSC的最适pH是偏酸的，这也是值得注意的一个问题。

待鹤

回复 6# kiesheep
: u# y+ K2 q+ ^3 o. H! l  N: x: j5 ]0 i
污染导致细胞增殖缓慢，引起细胞死亡，干性渐失，就容易分化了。

烂桃

我用15%的FBS养都没问题，不过我做过L-DMEM与F-12比较，前者高血清条件下易变圆，我觉得你这细胞比较像污染快要破碎或者快死掉了