请教酶切质粒电泳图的疑惑

小鲁鲁

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2010-3-26 19:45 上传

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电泳图

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小弟最近为了验证酶切到底是瞬间完成的还是需要过夜的问题，可是电泳的结果令小弟无法解释。6 g+ ?, R' j5 J, T' k
从左到右是酶切时间增加，可以看到出现了4条带，最前面的是线性化的。因为最后全部是最前面的条带了。但是线性化的质粒怎么会跑在最前面呢？怎么会出现四条带呢？正常的应该是超螺旋，线性化和开环三种吧！
8 C0 N! l. q, }- }$ h小弟用的是EcoR-1酶切PUC质粒。2 |: }! w& b! w6 V
谢谢各位的指教，请大家不吝赐教！

小鲁鲁

谢谢楼上赐教。
* M! O9 N1 P/ }1 Y+ m是只有两个酶切位点。但是第一泳道的图不能说明质粒不纯，四条带很清晰；而且也没有跑出泳道的问题，看第五泳道的条带亮度应该可以判断。
" U+ D( c# }& l! m, d我很疑惑的问题就是这四个条带是怎么来的。被酶切后的质粒就会形成线性化。% E$ b7 v$ F$ u
欢迎继续讨论。谢谢！

小鲁鲁

谢谢指教，我也只是自己检测一下，做个小实验检验。没有深究。谢谢支持！

小鲁鲁

是感觉有些问题，但是不好解释到底是什么问题。欢迎继续赐教！