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2D双向电泳?这个其实现在很多问题没有解决。首先是蛋白的溶解性质决定了后期电泳,脂溶性蛋白尤其是膜蛋白的问题 一直困扰着2D的进步;其次是蛋白的丰度问题,2D也不好解决。丰度高的蛋白很好做,丰度低的蛋白,即使水化时候加大上样量,胶条对低丰度蛋白的吸收也不会增强很多,这也限制了2D对低丰度蛋白的检测,尤其是活性蛋白的检测;再次是2D自身的缺陷--重现性不好,一般两次实验的重现率有70%都认为是比较好了。第四,2D对蛋白分子量的要求也限制了其应用,分子量太大,基本没有什么目的蛋白点出现,分子量太小了的话,很容易跑出胶,或者其他蛋白点分不开,可以查阅图片,分子量在120KD以上的双向电泳的图片都不多,并且结果不怎么好。最后2D做的再好,还要依赖于后期的质谱鉴定和验证工作。质谱仪也不是很多实验室都有的。/ n) {/ ?& p, }. ~( x
综上所述,2D的更为广阔的应用,还得依靠其他技术的进步和发展,尤其是化学和检测技术的发展,才能解决双向的先天不足。7 n) U' K: @; u9 o( P
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