小鼠BMSC原代培养经验交流贴~~

tanhehe1006

有可能有很多造血干细胞的污染的。小鼠骨髓MSC的培养其实和人与大鼠的还是有区别的
8 `; T; F4 y$ x' }9 l5 L你可以参考下面两个文章，都是来自Nature protocol的5 ~! N# T2 f1 J# @3 F4 |

tanhehe1006

附上我养出来的小鼠MSC图片吧

tanhehe1006

回复 10# china1983chen
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& J2 _; @* E/ M( i( k, \9 p) D2 `
    是原代，是p1的照片

tanhehe1006

回复 9# jisuyun
: i, V. x4 g3 {: G1 d  z. [
: O4 k% s: L, T+ W, H2 _$ D, O8 d( b9 ^$ p+ ^
    你提的这个问题很好，但是形态是不能说明问题的对吧。我完全复制我上边发的一片用骨片养的方法，你看看这篇文章吧

tanhehe1006

回复 17# jisuyun ! X. W) _% Z  v
% Z: H! g2 s. m
# `: K/ `1 c, C+ u
  119239794) h* Z5 M9 w5 c  C
其实我是最近才专投养小鼠MSCs的，希望能相互切磋

tanhehe1006

回复 27# angel-sakura
/ o) J1 O! N8 e: s! ]$ k( \/ w/ S5 h6 j

! ]' T# @; f% c6 J7 S% O    好问题，在多次传代中就消失了，况且骨片养的也提到p3-p8代研究么。重要的是在用胶原酶消化的那一步，骨片最好成一股粘絮状态，据我导师指点这样是MSC被消化下来和成骨细胞尚未很多被消化的临界状态。

tanhehe1006

回复 29# angel-sakura
+ b" u/ F5 U! W) |7 J+ t, ~2 [. s/ Z2 q% F  E. Q4 C( e
8 {. I) `+ O% b4 r" U
今天（昨天）我还做了。但是这回没有消化好，一般采取的浓度0.1%就可以了，时间我平常都是1.33-1.5个小时，我用的37℃摇床摇的。流式还没测，因为最近开始没多久，准备用消化的方法和多次传代的方法粗纯化后先反转录，流式正在预定中……那是必须做的，不知您做过流式没以及选用的标志物是什么？

tanhehe1006

回复 16# jisuyun . r0 F0 l; D( F( H& j
; @7 e' `( ?7 f
我用的是α-MEM，Hyclone的胎牛血清。消化就是用摇床，不过是可以调温和调速的