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本帖最后由 友康生物 于 2018-12-25 14:30 编辑
对于基因重组胰酶 常见问题及解答方法
1、 重组胰酶消化特点与传统胰酶一致吗?有什么特殊或需要注意的地方?
答:重组胰酶消化要比传统胰酶较快速,故大部分细胞消化时间会有所提前,需要避免消化过度,其它步骤与传统胰酶无差别 。
2. 第一次使用重组胰酶,按传统方法进行保存了?并且反复冻融,对活性有影响吗?
答:严格按说明书要求2-8度保存,避免反复冻融, 重组胰酶经过极限测试反复冻融十次活性无明显变化,相比传统胰酶更为稳定,如误操冷冻后溶解可继续使用。
3. 对于难消化的细胞如何提高消化效率?
答:如MDCK一般消化时间在13-15min,可以采用先预消化1min,弃去消化液,再加入新鲜消化液继续消化,时间可缩短3-5min。
4. 既然重组胰酶纯度高,活性强 ,是不是消化时可以减少用量?
答:消化时间在3min以内的细胞,可减少用量 (比如T25瓶 传统胰酶用1ml,重组胰酶用500ul即可)。
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