关于大鼠骨髓间充质干细胞培养问题

cmw930922

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这是P1的大鼠骨髓间充质干细胞，从实验到现在也做了有五批了，有一下问题想请假大家, d# W/ E% u# v  k0 y+ U
1.图片中体积很大的，成空泡状的是什么细胞9 z/ _, I  k+ l8 r6 J
2.我同时用低糖DMEM、α-MEM、DMEM/F12培养基养，血清是GIBICO的南美（买不起澳胎）感觉中间的增殖最快，最后的形态好，前者不怎么样，不知道大家是怎么样的, [' q% G' i5 M  {
3.由于实验条件有限，我每次取出大鼠的股骨和胫骨都要等4个小时左右才能取出细胞，不知道这样对细胞活力影响是否会很大  G" F( _6 D& K0 n' I
4.一般大家养大鼠的BMSC能养到第几代，我的细胞老化比较快，p2要7天左右才能传一代

henryjia

建议：
4 g# i; |, {1 N# C0 f/ \' z1. 传代一次观察是否有好转
: n' w* f0 q' |. u9 _; g2.传代时，胰酶处理时间控制在2分钟内，只收取脱壁细胞; ~2 T: w2 a- v; N
, b  y7 c) ]+ `) ]- D) ?
往往原代和一代细胞时会有不纯，传代也是净化提纯过程。; M" R8 O( V* O6 v* R' ]$ k
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祝好运！