关于大鼠骨髓间充质干细胞培养问题

cmw930922

; _6 T7 r+ A3 S8 b这是P1的大鼠骨髓间充质干细胞，从实验到现在也做了有五批了，有一下问题想请假大家
6 c: @8 j$ J+ m* ^) _1.图片中体积很大的，成空泡状的是什么细胞
# P& y+ L1 @7 N1 h6 [( G* y3 f4 g4 y2.我同时用低糖DMEM、α-MEM、DMEM/F12培养基养，血清是GIBICO的南美（买不起澳胎）感觉中间的增殖最快，最后的形态好，前者不怎么样，不知道大家是怎么样的1 B! U/ Z3 E' H5 T* E) w* i! _/ d
3.由于实验条件有限，我每次取出大鼠的股骨和胫骨都要等4个小时左右才能取出细胞，不知道这样对细胞活力影响是否会很大3 J& ?; f: _* @% u2 b$ t* W# p1 P
4.一般大家养大鼠的BMSC能养到第几代，我的细胞老化比较快，p2要7天左右才能传一代

henryjia

建议：
# B1 G* t- t& D8 {8 h9 l1. 传代一次观察是否有好转
9 Y1 x6 x1 X1 N; ?; P0 @$ m2.传代时，胰酶处理时间控制在2分钟内，只收取脱壁细胞
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) U4 A- M! t' C, f% O" O) I往往原代和一代细胞时会有不纯，传代也是净化提纯过程。
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祝好运！