NK培养的问题

Toyou

请问各位老师：
9 ^: D" {$ I- n      NK培养中，判断补液的标准是浓度吗？一般都是多少呢？NK培养遇到大问题了，后期细胞一直都不长，数量一直上不去，加因子都没用。

Toyou

回复 1435887852 的帖子; ~: H6 M7 ]/ q* f
3 o/ Q3 ^7 i) H/ |) V0 J6 P
感谢讨论，问个题外话；怎么得积分？怎么得威望呀？

Toyou

回复 曦馨橙子 的帖子
  c- T8 `' ]# Y2 ~' ~$ \7 y
# C# M! s* s+ D+ D) t我也想问。

Toyou

回复 1435887852 的帖子( w8 |6 ~4 w; o5 `3 G& n. S2 J. F
0 {1 I/ w  q6 x8 y8 A" Z# F
谢谢 老师回复。我是按照8*10^5个的浓度补液的，之前的一个样本就长的飞快，12天就有30亿了，但这个样本前期分离PBMC时红细胞太多没有处理，第5天时细胞就很少，然后我把浓度调成7*10^5就没长起来了。

1435887852

回复 曦馨橙子 的帖子
! M" V* I1 V. D8 C2 r5 h
- Y. E+ }- Y- E一般用激活的话保证时间在五天左右比较好

曦馨橙子

回复 1435887852 的帖子
; w/ h. ^1 V4 D5 S% F3 {+ f/ r: j' x1 |
请教一下，怎么判断过渡激活呢？

1435887852

nk培养一般来说是按照浓度来进行补液的，如果从源头控制了接种数量也可以按照培养天数来进行补液，但是这样补液会有些不准确，毕竟每份样品的生长状况不可能100%相同，所以按照浓度补液是相对稳妥的。一般控制1/2*10^6就好了。后期一直不长的话，你看看在前期培养你诱导激活了多久，是否过度激活，导致后期细胞失去活性