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本帖最后由 细胞海洋 于 2011-10-5 09:16 编辑 ' L& y7 w" O, l3 U S
5 S7 \, W [. u# l8 R0 O& K2 s6 {Long-term Coculture of Spermatogonial Stem Cells on Sertoli Cells Feeder Layer in vitro
6 E( W, v1 W3 N# u2 a【作者中文名】 张德迎; 何大维; 魏光辉; 宋晓峰; 李旭良; 林涛;
# j, ?# ]4 r: H) \【作者英文名】 ZHANG De-ying; HE Da-wei; WEI Guang-hui; SONG Xiao-feng; LI Xu-liang; LIN Tao Department of Pediatric Urology; Children's Hospital of Chongqing Medical University; Chongqing; 400014; China; : A6 R* m) A1 h; b* V6 {
【作者单位】 重庆医科大学儿童医院泌尿外科; 重庆医科大学儿童医院泌尿外科 重庆;
?8 x0 _7 ]+ Q6 D- j; ?8 [: b【文献出处】 四川大学学报(医学版), Journal of Sichuan University(Medical Science Edition), 编辑部邮箱 2008年 01期
: F+ o6 g4 Z( j& v期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊 / `* @3 J3 d- `- ?9 k% Z& j
【关键词】 生精细胞; 支持细胞; 共培养;
& w; r, \+ M/ s% {【英文关键词】 Spermatogcnic cell Sertoli cell Coculture;
" P- g( I, h- s4 d" m【摘要】 目的建立体外研究精原干细胞与支持细胞共培养的细胞模型,研究体外精原干细胞在支持细胞层上的增殖特点。方法应用两步酶消化法,分别从14～15d及6d龄雄性昆明小鼠睾丸中分离支持细胞及精原干细胞,采用免疫细胞化学方法鉴定。将精原干细胞接种在支持细胞层上,观察不同时间点精原干细胞集落形态及数目。结果在支持细胞层上培养24h后,精原干细胞开始增殖分裂,呈双细胞形态;随着培养时间延长,双细胞集落数逐渐减少,而链状细胞集落逐渐增加;培养120h后,链状细胞局部融汇堆积,且细胞集落维持在相对稳定数量。在每4～5d更换培养液的条件下,细胞集落维持稳定状态的平均时间为(51,2±5.8)d。结论精原干细胞在体外支持细胞层上呈集落样生长,并能长时间维持细胞集落形态及数目,可用于体外研究生精细胞增殖分化特征、药物或毒物干扰精原干细胞功能实验。
3 R; @4 V+ e) i/ w0 a【英文摘要】 Objective To construct a cell model of spermatogonial stem cells(SSCs)cocultured on Sertoli cells feeder layer in vitro,and study the proliferation characteristics of SSCs.Methods Sertoli cells and SSCs were separated from testes of 14-15 days and 6 days KM mice respectively by two-step enzyme digestion.SSCs were seeded on the Sertoli cells layer at 5 days in culture.The clones of SSCs on the sertoli cells layer were detected,and cast-off cells in culture medium were counted.Results SSCs began to proliferat...
% S8 Q$ Y" @: \- Y1 O1 V. t【基金】 国家自然科学基金(批准号30672196)~~ 1 s3 w. k! q! L) ?3 Z
【DOI】 CNKI:SUN:HXYK.0.2008-01-003
1 T: i1 \( d# S# J6 g; [( t
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http://www.rayfile.com/zh-cn/files/35bd848c-f923-11dd-936e-0014221b798a/ |
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发表于 2009-2-13 00:27
发表于 2009-2-20 09:46
看看！
