精原干细胞在支持细胞饲养层上的长期培养(英文)

雨中穿行

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4 d$ u5 ]$ p# j% O/ ?, o# cLong-term Coculture of Spermatogonial Stem Cells on Sertoli Cells Feeder Layer in vitro ' e) w7 [% y% Q1 b0 d9 B
【作者中文名】 张德迎; 何大维; 魏光辉; 宋晓峰; 李旭良; 林涛;
4 D0 l, H# g0 A7 H【作者英文名】 ZHANG De-ying; HE Da-wei; WEI Guang-hui; SONG Xiao-feng; LI Xu-liang; LIN Tao Department of Pediatric Urology; Children's Hospital of Chongqing Medical University; Chongqing; 400014; China;
- l/ L7 ~+ {, B6 X2 l【作者单位】 重庆医科大学儿童医院泌尿外科; 重庆医科大学儿童医院泌尿外科 重庆; ; h! U8 I% ^! E) S
【文献出处】 四川大学学报(医学版), Journal of Sichuan University(Medical Science Edition), 编辑部邮箱 2008年 01期  / b& @! L! k6 Y0 _
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, M2 B2 `* m. s/ Z; P; m【关键词】 生精细胞; 支持细胞; 共培养;   o# s* L. I6 Z. o$ x
【英文关键词】 Spermatogcnic cell Sertoli cell Coculture;
- _2 e: D+ B9 T; L& v【摘要】 目的建立体外研究精原干细胞与支持细胞共培养的细胞模型,研究体外精原干细胞在支持细胞层上的增殖特点。方法应用两步酶消化法,分别从14～15d及6d龄雄性昆明小鼠睾丸中分离支持细胞及精原干细胞,采用免疫细胞化学方法鉴定。将精原干细胞接种在支持细胞层上,观察不同时间点精原干细胞集落形态及数目。结果在支持细胞层上培养24h后,精原干细胞开始增殖分裂,呈双细胞形态;随着培养时间延长,双细胞集落数逐渐减少,而链状细胞集落逐渐增加;培养120h后,链状细胞局部融汇堆积,且细胞集落维持在相对稳定数量。在每4～5d更换培养液的条件下,细胞集落维持稳定状态的平均时间为(51,2±5.8)d。结论精原干细胞在体外支持细胞层上呈集落样生长,并能长时间维持细胞集落形态及数目,可用于体外研究生精细胞增殖分化特征、药物或毒物干扰精原干细胞功能实验。
$ l) G! [; U1 F. T7 X: |! ?9 O* d【英文摘要】 Objective To construct a cell model of spermatogonial stem cells(SSCs)cocultured on Sertoli cells feeder layer in vitro,and study the proliferation characteristics of SSCs.Methods Sertoli cells and SSCs were separated from testes of 14-15 days and 6 days KM mice respectively by two-step enzyme digestion.SSCs were seeded on the Sertoli cells layer at 5 days in culture.The clones of SSCs on the sertoli cells layer were detected,and cast-off cells in culture medium were counted.Results SSCs began to proliferat... - D+ D2 H& A) j& j5 E; G: M
【基金】 国家自然科学基金(批准号30672196)~~
& y* g9 A# E+ d- ?8 X【DOI】 CNKI:SUN:HXYK.0.2008-01-003
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