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本帖最后由 细胞海洋 于 2011-10-5 09:16 编辑 8 _: u4 A& H* r, \* [
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Long-term Coculture of Spermatogonial Stem Cells on Sertoli Cells Feeder Layer in vitro
$ ^4 s6 G) Q L3 ^. {7 j【作者中文名】 张德迎; 何大维; 魏光辉; 宋晓峰; 李旭良; 林涛;
7 }+ P5 ~- E6 Z& Q3 y/ p# K, X: }7 |$ x【作者英文名】 ZHANG De-ying; HE Da-wei; WEI Guang-hui; SONG Xiao-feng; LI Xu-liang; LIN Tao Department of Pediatric Urology; Children's Hospital of Chongqing Medical University; Chongqing; 400014; China;
6 H0 I j4 I# F【作者单位】 重庆医科大学儿童医院泌尿外科; 重庆医科大学儿童医院泌尿外科 重庆;
% I9 f$ @1 K k# g【文献出处】 四川大学学报(医学版), Journal of Sichuan University(Medical Science Edition), 编辑部邮箱 2008年 01期
7 n1 e, a; Q; _* }0 c期刊荣誉:中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊 - Q, c6 X9 X1 }. l% G) E
【关键词】 生精细胞; 支持细胞; 共培养; 7 }5 E; w* J7 [9 k" I+ D' ~
【英文关键词】 Spermatogcnic cell Sertoli cell Coculture; 2 }# O/ f( [: m! t2 @- W
【摘要】 目的建立体外研究精原干细胞与支持细胞共培养的细胞模型,研究体外精原干细胞在支持细胞层上的增殖特点。方法应用两步酶消化法,分别从14~15d及6d龄雄性昆明小鼠睾丸中分离支持细胞及精原干细胞,采用免疫细胞化学方法鉴定。将精原干细胞接种在支持细胞层上,观察不同时间点精原干细胞集落形态及数目。结果在支持细胞层上培养24h后,精原干细胞开始增殖分裂,呈双细胞形态;随着培养时间延长,双细胞集落数逐渐减少,而链状细胞集落逐渐增加;培养120h后,链状细胞局部融汇堆积,且细胞集落维持在相对稳定数量。在每4~5d更换培养液的条件下,细胞集落维持稳定状态的平均时间为(51,2±5.8)d。结论精原干细胞在体外支持细胞层上呈集落样生长,并能长时间维持细胞集落形态及数目,可用于体外研究生精细胞增殖分化特征、药物或毒物干扰精原干细胞功能实验。
( l. e: }% F u0 y% ]9 J# O【英文摘要】 Objective To construct a cell model of spermatogonial stem cells(SSCs)cocultured on Sertoli cells feeder layer in vitro,and study the proliferation characteristics of SSCs.Methods Sertoli cells and SSCs were separated from testes of 14-15 days and 6 days KM mice respectively by two-step enzyme digestion.SSCs were seeded on the Sertoli cells layer at 5 days in culture.The clones of SSCs on the sertoli cells layer were detected,and cast-off cells in culture medium were counted.Results SSCs began to proliferat...
/ i1 y/ y) I* ~! w+ @【基金】 国家自然科学基金(批准号30672196)~~ + e& j# _5 o& h- x2 G* b3 ]
【DOI】 CNKI:SUN:HXYK.0.2008-01-003
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