LIF应该如何稀释呢？10-7次方的

qgjin

' Z) L* f5 Y: m+ H) F

9 W: a" q& k* g. ^1ml稀释成10L？   你先看看标签， 是不是有PBS稀释的；要是是 请如下操作；
: d! @5 g" G% N9 t1：取 1ml LIF 移到15ml 灭菌的tube5 a; |$ d: y$ {# {8 h8 D; f$ O
2：用 1ml  PBS （0.22um过滤的）冲洗LIF 小瓶（小心不要把PBS洒出来）；
1 K5 L9 y% }# x2 l! R3：将冲洗的PBS 移到15ml 灭菌的tube；2 \, t6 B/ W* _$ Q/ O
4：将步骤2-3 重复3次；6 a5 d. ^* A; {: d: Y
5：将15ml 灭菌的tube定溶到10ml，封口并混均；（直接添加6mlPBS有可能不够）
, i$ E, ?1 |3 V& u2 q* T9 ~此操作中，15ml 灭菌的tube最好是 10ml定溶瓶。9 q  k: g! y* U- S5 V1 C9 {. A& z
6：将0.5ml LIF 稀释液 装入1.5ml离心管（灭菌）；# c4 u3 d, w& D4 y4 o, {: _6 `) U* S
7：用parafilm 封口，标签，保存（原保存温度）。6 E) I- t; Z3 T4 `9 x7 J
每配制500ml培养液时 添加一管（稀释的0.5ml LIF）。- B7 v% J. I; C, \# p
此方法一般适用于配制培养液，或大容量的（100-1000ml）稀释。
$ k+ d5 j1 Z3 q% x方法二( O) h4 Z5 J2 o* s4 _; r1 y
1：取450ul PBS 移到1.5ml离心管（灭菌）；
" A: o; {+ z/ W3 W2：取50ul LIF原液 移入到装有450ul PBS 的1.5ml离心管（灭菌）；, E& g$ e) h  E. j" g
3：封口，摇均，标签， 保存。
0 z7 ?8 Q! E0 F/ H此方法适用  g& L5 |: }7 x- ]5 [, R8 W
注意：必须封口，贴标签；操作要在洁净工作台。
$ P# E4 _8 b& H3 J5 [3 N) g原理: 1ml（20*50ul） 可配 10L（20*500ml）培养液， 因此50ul原液可配置500ml培养液 。

qgjin

对了，使用时，可以用小型离心机离心一下，使贴在盖上的液滴滑入1.5ml离心管底部！！切记！！！

qgjin

谢谢 ，你考虑的很周到了 。  
: I0 V5 C; g" v) ^% J 1是分装     我想用DMEM也是可以的 ，1ML 10-7次的 加9ML DMEM  后
7 u, r, d  ~, F( \* ]0 e4 S  .../ s: s" W( P- c; b5 N0 E0 {
上海过客 发表于 2010-5-6 13:15

* u( W1 n) J. z1 }0 b

. _4 l1 P0 t1 d$ a( J% x7 Q. S4 T# P2 Q+ _3 |* ?& b' n
原液瓶够大， 这样当然最好了

qgjin

回复  qgjin
7 q! z  s; w0 O8 J' ]( _7 I) c/ e* X; Z& r* S. D% P1 \
此人回答极为详细。不过我们这边现在都用自己做的LIF。用于ips诱导是没问题的。; m) O1 Q% I2 i  ]- r* a8 u1 r
Jonathan 发表于 2010-5-6 12:41

3 K& s# C% ]$ m3 h  p* g6 H
7 o8 Z* S% T( O+ r3 ]

8 ^7 L" s/ }) m6 c) A; S5 p 请问能不能讲解一下自己制作LIF的方法吗