LIF应该如何稀释呢？10-7次方的

上海过客

LIF应该如何稀释呢？10-7次方的$ k8 X1 C. y+ V8 a8 v% f9 l* W

6 m% Y# S+ E  ^- [9 Q买了够配10升培养基的LIF应该如何稀释呢？
, \( P: M' D4 J: n
! M% P* i2 O4 [4 U, Z4 A3 V想把它小量分装了 。  250ML 或者 500ML的 量 。/ S( @" P# x/ O% R& j

/ A6 r2 [& l$ o& X) {! j# u1ML 的母液用着感觉 不好  ，浓度降一点 ，分装一下 。
8 b7 j) ]8 F. y0 J( B" S0 n$ [2 Q* P& K8 y8 Y. c4 q* f; L
做过的 ，请不吝赐教

周会

我买的是10-6次方的 ，不稀释直接用，每次加千分之一！

wyannb

我买的直接就是10六次方Iu的，用多少加多少，这个在四度保存也用不着分装啊。要是-20的话分装还可以。

上海过客

10-7 的 价格 便宜啊 。

tianangelt

回复 4# 上海过客 6 s' z0 Q9 Q/ v

+ I5 \( `- {5 x( G4 M, J" j) x% l! g' p
6 B, M( s/ v* N4 \  X$ G    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。

hcoohboy

我买的是Chemicon公司的，四度保存，不需要分装，除非很多人用，每人分一支

上海过客

回复  上海过客 8 A( [: A4 j6 }! O0 v, u5 `( F

: Z" A( {. B( u2 h1 M' Z# X7 [! s. ]4 @6 l0 U
    您好，请问您用LIF是用来养干细胞的吗？我也在做，想和您交流一下。6 k. V0 j% ?, b2 k4 s0 \; {
tianangelt 发表于 2010-5-5 10:15

1 Y7 u1 H5 r! b' x2 Z; R% t9 G7 c4 x$ d
是培养 干细胞的 。

上海过客

10-7 的包装 盖子比较讨厌 ，不是螺旋盖，好像胶头总会有一些溶液，看着挺可惜的。* v0 Y2 ~. a$ y' [  }- W4 ?
7 ]/ D# Y% f. P  p, f# M& k: O# U
所以  想分装一下  扩大一下体积 ，损耗小一点

qgjin

" b: [, o2 ]0 I  e* ]! c

+ j  z8 y7 O. a' o+ u1ml稀释成10L？   你先看看标签， 是不是有PBS稀释的；要是是 请如下操作；2 L  e" }$ [- t, F3 F4 B, p$ L1 D5 N
1：取 1ml LIF 移到15ml 灭菌的tube6 w' r% w6 y6 `4 d5 n
2：用 1ml  PBS （0.22um过滤的）冲洗LIF 小瓶（小心不要把PBS洒出来）；+ U( @& I2 z1 b4 n  T
3：将冲洗的PBS 移到15ml 灭菌的tube；- B* s( q" f  W" v% V. F7 }
4：将步骤2-3 重复3次；% }( s3 q/ m' i9 J+ e
5：将15ml 灭菌的tube定溶到10ml，封口并混均；（直接添加6mlPBS有可能不够）; ]3 }+ U& G! ~' J6 W
此操作中，15ml 灭菌的tube最好是 10ml定溶瓶。
, H$ u4 ~+ z3 E/ A* z1 S6：将0.5ml LIF 稀释液 装入1.5ml离心管（灭菌）；+ ]# x) ?* s  O! E& U- R
7：用parafilm 封口，标签，保存（原保存温度）。0 l6 O9 V; F" _0 i+ m) z* e7 x
每配制500ml培养液时 添加一管（稀释的0.5ml LIF）。
% o5 a8 @8 A$ ]+ T. y$ a! V! L此方法一般适用于配制培养液，或大容量的（100-1000ml）稀释。
; m4 @$ t! b9 R5 X7 V1 {1 J, {方法二
7 \1 \! \. [* D# V/ J1：取450ul PBS 移到1.5ml离心管（灭菌）；( @# d6 p" r6 t* x# }# F) a1 z
2：取50ul LIF原液 移入到装有450ul PBS 的1.5ml离心管（灭菌）；
+ X% I# w. i6 I3：封口，摇均，标签， 保存。/ ~) l; ]+ I; M+ `' ]) t
此方法适用
* B. N. E- ]: t& l注意：必须封口，贴标签；操作要在洁净工作台。
6 z" Q) e( y7 Z/ }% n6 F. [& v原理: 1ml（20*50ul） 可配 10L（20*500ml）培养液， 因此50ul原液可配置500ml培养液 。

qgjin

对了，使用时，可以用小型离心机离心一下，使贴在盖上的液滴滑入1.5ml离心管底部！！切记！！！