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楼主: 上海过客
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LIF应该如何稀释呢?10-7次方的   [复制链接]

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发表于 2010-5-6 12:41 |只看该作者
回复 9# qgjin ! i2 J! |$ u* ?6 V7 T. d

# B8 W7 J* s4 j- X, P+ o# ?此人回答极为详细。不过我们这边现在都用自己做的LIF。用于ips诱导是没问题的。

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发表于 2010-5-6 12:54 |只看该作者
自己怎么做 啊

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发表于 2010-5-6 13:15 |只看该作者
1ml稀释成10L?   你先看看标签, 是不是有PBS稀释的;要是是 请如下操作;
4 s: a6 E" ]- S$ f$ e1:取 1ml ILF 移到15ml 灭菌的 ...- J3 y: r& b0 |' s
qgjin 发表于 2010-5-5 16:10
: m# C& C9 Y9 k& T$ c
/ A3 O8 Y( Q( n+ Q4 K
谢谢 ,你考虑的很周到了 。  
$ g$ s  D6 }- w2 p  {+ |' s 1是分装     我想用DMEM也是可以的 ,1ML 10-7次的 加9ML DMEM  后
3 _5 W" h0 {1 [  V7 ?                                      0.5ML分装为20管,每管可以配置500ML  培 养基,或者分两次各配250ML培养基
9 V# b4 O% q9 y, `' }, l+ Y
, @+ q0 b6 u  O( J& @. Z9 j 2 需要离心 。  这个的确是需要做的 ,10-7 次的 LIF 损失一点,量都很大啊。
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发表于 2010-5-7 03:29 |只看该作者
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谢谢 ,你考虑的很周到了 。  - q& M5 U0 L2 X6 \" b
1是分装     我想用DMEM也是可以的 ,1ML 10-7次的 加9ML DMEM  后
9 P" o  x  H! g' ?. ]6 |  ...
. }6 l0 j! f, O" ~上海过客 发表于 2010-5-6 13:15
+ D" ?+ R; r$ e+ s# a1 b

2 o! X! r8 Q' X8 ^1 V
; v( s5 Q4 o- X2 P+ U% V1 d原液瓶够大, 这样当然最好了

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发表于 2010-5-7 03:31 |只看该作者
回复  qgjin $ i. V# G* M7 a; j* t7 d

- Q9 |& C: d2 A9 e此人回答极为详细。不过我们这边现在都用自己做的LIF。用于ips诱导是没问题的。
5 d; e9 c4 V  x. {( aJonathan 发表于 2010-5-6 12:41
+ l( o8 D# g' g: h: ^$ J
# p) |% C5 D. }0 o* S

9 p( ?% m- f) ]6 } 请问能不能讲解一下自己制作LIF的方法吗

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发表于 2010-5-7 14:51 |只看该作者
回复 7# 上海过客 + x) j0 A4 V6 r7 J4 s& G9 e

+ J! k3 q5 s2 u: d7 D% K$ [
7 [1 i. F8 ~# O2 I3 \0 H5 k$ f    我们是构建的重组LIF质粒,您是用LIF维持干细胞未分化状态吗?主要做哪方面呢?
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发表于 2010-5-10 21:42 |只看该作者
用1%BSA/PBS稀释到10-6,每次用的时候1000倍稀释,分装的时候就看你平时配液的用量,要是配100ml就分装100ul。
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