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[请教] 在细胞培养冻存时,冻存液中为什么要加入DMSO,它的作用原理是什么?   [复制链接]

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发表于 2010-5-7 09:56 |只看该作者 |正序浏览 |打印
在细胞培养冻存时,冻存液中为什么要加入DMSO,它的作用原理是什么?
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发表于 2010-6-2 13:52 |只看该作者
本帖最后由 gaomei210 于 2010-6-2 13:56 编辑
2 Q3 a2 ]) t6 `! c
( R( H- i7 s; Z8 A# A1 e5 [; bDMSO是保护细胞,不会因为温度骤降而冻死,我一般加10%DMSO和血清混合,实验室也有人用DMSO+FBS+DMEM的,使用DMSO的时候需要注意两点:1.有毒,可通过皮肤渗入。2.DMSO和FBS、DMEM混合时放热,要充分混合10min后再加细胞。
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发表于 2010-6-1 12:40 |只看该作者
DMSO中文名为二甲基亚砜,是一种有机溶剂。当冻存细胞时,细胞受到物理损伤,即细胞内形成较大的冰晶,破坏细胞膜系统,DMSO可以防止大冰晶的形成。达到保护细胞的作用。
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发表于 2010-5-30 18:08 |只看该作者
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回复 10# xus1019 / Q. C! O$ z5 B9 n4 G
原來5%就夠了阿~
8 u2 P  i0 B9 }1 n& d! A5 c  G& l, ?
我們一般Final concerntration 都是用10%DMSO + 血清或培養液
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发表于 2010-5-27 13:11 |只看该作者
冻存细胞时,我们是10%的DMSO,但是会预先加入一部份DMEM来溶解,因为DMSO溶解的时候会产生热,会把细胞杀死的。。
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发表于 2010-5-26 23:22 |只看该作者
冻存保护剂,一般使用时5-10%
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发表于 2010-5-7 21:16 |只看该作者
我们一般用10%的DMSO,解冻后加有血清的培养液1500转离心5分钟 洗干净上清重新加上新的培养液就可以了。 我用过的几种细胞存活率都很高!
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发表于 2010-5-7 14:06 |只看该作者
为了防止细胞在冷冻的时候被冻死。一般冻细胞加10%的DMSO。冻细菌的时候可用甘油。
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发表于 2010-5-7 13:51 |只看该作者
我们使用的DMSO浓度都是10%
8 b, R. [6 r2 w1 ]5 O. [5 P冻存前现配并且预冷,因为在较高温度下甚至室温都会有较大毒性。为了更好的保存细胞,我们适当提高下血清浓度
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发表于 2010-5-7 13:28 |只看该作者
回复 12# sunsong7
8 h  w! \1 e, Y' q9 d/ s. s5 t8 g2 I8 K% E6 i2 }9 D8 G0 N+ k* p

& V0 |' M/ U% ^# ^    谢谢总结!
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