RACE技术

hdc2001

谁做RACE的啊？大家来说说心得，分享一下成果吧。最好能图文并茂呀。

细胞海洋

请先开个头 抛砖引玉

hdc2001

我准备做RLM-RACE' v0 y* Y; v- K) @
现在考虑：# C" g; w) g% A: D
1. mRNA是否需要纯化？
) V) w3 f: O- `; X- @$ R8 g3 J: Z2. cDNA合成引物是随机引物，Oligo dT，还是基因特异性引物好？

hdc2001

刚用RACE做完4个基因，效果很好，都成功了。
3 E  Q* G7 g- D- s) Q2 x1、引物设计很重要；+ u7 W5 o3 c/ w# u
2、实验前的准备工作要充分；多阅读文献；8 R# w# L+ Q9 j
3、操作要细心；$ t! f: f: P1 A9 l2 m/ `
4、要做好持续战斗的心理准备。

baixueyao029

回复 4# hdc2001
# a( k3 i, B# d' T. R- v6 D- k你的引物是随机引物，Oligo dT，还是基因特异性引物？

yueyongheng

RACE ：Rapid Amplification of cDNA Ends （快速扩增cDNA末端）(Described by Frohman in 1988)1 U0 K# Y, [1 Q) Q9 |( A# P# J% N
用于获得全长基因的5’和3’末端（需要知道基因的25个碱基的序列）
) z/ b# a8 z. v$ G) zWhy do I need the end?
/ \$ Q8 R5 f" T, m- u" z–进行蛋白表达3 P; i3 T8 h# M# `( v. s# V
–分析转录起始位点（5‘端含有调控序列）" I: |/ }0 q- x1 j' ]6 F
–研究基因$ n8 v. P5 Z% r4 A+ Z
cDNA完整序列的获得对基因结构、蛋白质表达、基因功能的研究至关重要。但是传统的方法难以得到两端的序列（尤其是5‘端）。

yueyongheng

转了一连接主要讲RACE技术的原理和操作
/ q. _3 I/ Q9 Ghttp://www.biomart.cn/experiment/430/457/464/25163.htm

hhchen418

请相信阅读说明书。本人当年是用的invitrogen的，当时也是头一次做RACE，但最终成功了。引物设计非常关键，为了避免走弯路，mRNA要进行纯化