MSCS诱导分化后的免疫细胞化学鉴定

duoduo777001

我做的是脂肪的，步骤跟你有点不一样：
: n0 `6 [( W# [' M固定，3.5%PFA，30min
$ Z5 ], i* D+ m, ]: a1 v) ^透膜，15min RT
; y% i& {) I7 F1 [' I/ W封闭，1%BSA 1h RT dark4 Z6 v' F: C+ D6 w! p+ f
加抗体之前我都洗了的
8 s/ N  N" i% n. V  r过夜后，拿出来直接洗，在加2抗。" @* T, ]) P0 ?0 q- n6 z3 z
最后加入DAPI 10ug/ml

duoduo777001

回复 8# lorey
, v% B, \6 P; ?9 [, c! ?. d  Q4 E
$ `6 H7 z7 B1 d$ T, q) r# ]  _
+ j# G$ ?8 @+ z! }4 `: Q    wash buffer我一直都是用的1XPBS，DAPI用的是10ug/ml，做过孵育一个小时的，也做过过夜的，个人觉得过夜的效果好一点，但是理论上是两个都可以。另外我们DAPI洗过之后，会在用mounting solution固定。避光4°条件可以保存一个月。

duoduo777001

回复 1# bypw
. `/ j, S; J# S' ~4 x/ I% Z: N+ ~/ h( T1 T, e
& e1 |5 U5 [6 l$ P* M1 P/ V6 N
    请问是不是一定要湿敷