各位 有没有 肌源性干细胞 转染 相关的 文献或者 资料？

学习快乐

本人 要做 肌源性干细胞 转染 相关的课题。, ?: y1 s+ @( C0 f
不知道那位 做过的 把经验和注意的 问题 给讲讲。+ [. o" s! K- X. v3 l& {5 j
多谢

细胞海洋

最好把你的问题具体一些

学习快乐

好的。我把问题汇集一下 和大家讨论。多谢。

念想儿

回复 1# 学习快乐 # D6 }) J1 z& @+ i4 k9 C6 u( B
我一直在做牛肌源干细胞的转染。肌源干细胞跟成纤维相比，转染的难度要大很多。我试过FuGENE HD，LIPOFECTAMINE 2000 ，效果都不是太好。用GFP做报告基因，基本上一个视野只能看见5个左右的阳性信号。后来又试过PEI,感觉这个还可以，起码转染之后的细胞做western以及RT-PCR都是有结果的。
4 U  B0 V7 I- ?" J" m$ [不知道对你有没有帮助，希望大家多多交流。呵呵~

学习快乐

回复 4# 念想儿 9 G5 d1 B6 p9 z! @

7 n+ B* ^! d: V! {6 }4 N/ f3 g. V' I$ i; B7 u9 x; F8 Z' E. ~
    你好。我现在只是实验初期。不知道怎么回事，肌源性干细胞 培养培养着就污染，反复几次了。培养基也没事。郁闷啊。

念想儿

回复 5# 学习快乐 请问你那个物种的细胞？能不能把你的培养液配方说下，我可以帮你看看~

学习快乐

回复 6# 念想儿
. s# v5 O6 M. O/ ^& J我是做 S-D大鼠的 MDSCs。培养基的 " _* i5 b8 ^. v+ f
配方：DMEM（低糖）+FBS+马血清（8:1:1）。开始也叫了 CEE（鸡胚提取物）但太贵了。实验又不顺利，就暂时 没用。希望养的好的时候 再用那部分由CEE的培养基。一直没有加过双抗。但昨天有的同学 建议我加双抗，毕竟实验室条件也很差。
$ Z6 _5 a7 j; G4 ]下面接下来要免疫荧光鉴定。也有很多请教。, y9 h9 R. \2 v. }% F
我的邮箱：anan_1125@126.com。

念想儿

回复 7# 学习快乐 9 p8 L' ?0 S. c
哦，是这样。我们实验室做的是牛的肌源干细胞，那培养方面可能有所不同。我们的培养液配方是DMEM+10%FBS+20%HoS,另外在养细胞的瓶子底部铺了左旋多聚赖氨酸促进生长贴壁。双抗一定要加，还要及时传代，不能马虎。鸡胚提取物我也用过，但是它只会让细胞加速生长，对细胞的分化没有什么作用。由于cell line 不同，也不知道我说的这些能不能帮到你，希望我们共同探讨，呵呵~~