各位 有没有 肌源性干细胞 转染 相关的 文献或者 资料？

学习快乐

本人 要做 肌源性干细胞 转染 相关的课题。
3 M5 f! O9 @# p8 v5 P$ n0 c不知道那位 做过的 把经验和注意的 问题 给讲讲。
3 d# g, C% b- m) @: J多谢

细胞海洋

最好把你的问题具体一些

学习快乐

好的。我把问题汇集一下 和大家讨论。多谢。

念想儿

回复 1# 学习快乐
& v- |  ~; a6 |& n6 O我一直在做牛肌源干细胞的转染。肌源干细胞跟成纤维相比，转染的难度要大很多。我试过FuGENE HD，LIPOFECTAMINE 2000 ，效果都不是太好。用GFP做报告基因，基本上一个视野只能看见5个左右的阳性信号。后来又试过PEI,感觉这个还可以，起码转染之后的细胞做western以及RT-PCR都是有结果的。
+ {0 p$ d% k& ]) I不知道对你有没有帮助，希望大家多多交流。呵呵~

学习快乐

回复 4# 念想儿 / q/ K7 i' }+ M  k4 ]
  ]3 L1 `6 R' `5 B/ M" R. E

( Y1 a3 f, D$ {* p    你好。我现在只是实验初期。不知道怎么回事，肌源性干细胞 培养培养着就污染，反复几次了。培养基也没事。郁闷啊。

念想儿

回复 5# 学习快乐 请问你那个物种的细胞？能不能把你的培养液配方说下，我可以帮你看看~

学习快乐

回复 6# 念想儿 $ |8 G: K) v& j- K5 }- \
我是做 S-D大鼠的 MDSCs。培养基的 0 G* Z+ o% }4 V! z4 }  R
配方：DMEM（低糖）+FBS+马血清（8:1:1）。开始也叫了 CEE（鸡胚提取物）但太贵了。实验又不顺利，就暂时 没用。希望养的好的时候 再用那部分由CEE的培养基。一直没有加过双抗。但昨天有的同学 建议我加双抗，毕竟实验室条件也很差。
9 ?  F" T! T/ G" p. Q下面接下来要免疫荧光鉴定。也有很多请教。; |# _+ k) i; c: p5 W: P
我的邮箱：anan_1125@126.com。

念想儿

回复 7# 学习快乐 5 S* |) t6 J: ?- i& j; b+ _
哦，是这样。我们实验室做的是牛的肌源干细胞，那培养方面可能有所不同。我们的培养液配方是DMEM+10%FBS+20%HoS,另外在养细胞的瓶子底部铺了左旋多聚赖氨酸促进生长贴壁。双抗一定要加，还要及时传代，不能马虎。鸡胚提取物我也用过，但是它只会让细胞加速生长，对细胞的分化没有什么作用。由于cell line 不同，也不知道我说的这些能不能帮到你，希望我们共同探讨，呵呵~~