神经干细胞冻存液为什么要加胎牛血清？

huangfei2010

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10%），我的疑问就是正常神经干细胞培养液是DMEM/F12，EGF,b-FGF,不加胎牛血清的，为什么冻存的时候把生长因子撤掉，换胎牛血清？胎牛血清是诱导分化的啊，虽然液氮保存细胞基本不代谢，可是为什么文献上冻存时都不要生长因子了呢？小弟才疏学浅，刚开始养神经干细胞不懂其中道理，还请大家帮忙分析下。谢谢

xzmcyy@163.com

我冻存仅用胎牛血清加二甲基亚砜，原因没有仔细想过和查过，因为是实验室一直那么做的，而且效果很好，我会查下原因

iseeyou1210

你可以看看这篇文献，他们只是用medium w/o EGF and FGF +15% DMSO来冻存 neurosphere的。# r1 n; X" I* L
http://www.natureprotocols.com/2 ... l_culture_neuro.php

huangfei2010

回复 2# xzmcyy@163.com
* A" i  i# U9 d) y, ]$ u6 m$ k- N% N/ w1 H7 V, B; O
谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210
4 b: u  {" c8 W' Z# D5 w: K
6 ~/ L' T. C( O, Q4 {& m# Z
* j: a; l& {( s! C    谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210
& d- W# ]6 x2 G$ M  _& F
1 q/ }% H/ V) g( \" S4 sRemove the supernatant and re-suspend the cells in 10.0 ml SFM (without EGF and FGF) containing 15.0% dimethyl-sulfoxide (DMSO).
( _4 V  q. @# \3 f% DNeurosphere viability can also be enhanced by the addition of 20% fetal bovine serum (FBS) to the freezing medium. However, keep in mind that FBS will induce differentiation，谢谢你的文章

savid888

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10 ...3 i0 b/ S0 S. U3 s  Q6 D  I
huangfei2010 发表于 2010-5-19 09:48

) [9 i9 R/ r0 _7 s9 e: ~/ i: ]1 l) g, B
神经干冻存时还是多用serum-free培养基吧？我们就这样用的，但是复苏成活率确实比较低
+ L3 k* F0 M% K+ N/ h你说的文献是哪篇文献呐？

huangfei2010

回复 7# savid888
$ Z$ U6 N& \  B5 {8 }; |1 r9 B/ |; _$ g& I5 o- h
# v' t  k) _( I& L! i, a
    文章发上来，你看下，能把你的冻存方法和相应文献也传上来吗，谢谢

savid888

我们冻存方法沿用师兄师姐的做法，没有文献呢。
# q# G: z1 C( M- T# Q培养神经干用的无血清培养基+10% DMSO，梯度降温冻存

meirongwan

可以用全胎牛血请加dmso复苏更好