神经干细胞冻存液为什么要加胎牛血清？

huangfei2010

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10%），我的疑问就是正常神经干细胞培养液是DMEM/F12，EGF,b-FGF,不加胎牛血清的，为什么冻存的时候把生长因子撤掉，换胎牛血清？胎牛血清是诱导分化的啊，虽然液氮保存细胞基本不代谢，可是为什么文献上冻存时都不要生长因子了呢？小弟才疏学浅，刚开始养神经干细胞不懂其中道理，还请大家帮忙分析下。谢谢

xzmcyy@163.com

我冻存仅用胎牛血清加二甲基亚砜，原因没有仔细想过和查过，因为是实验室一直那么做的，而且效果很好，我会查下原因

iseeyou1210

你可以看看这篇文献，他们只是用medium w/o EGF and FGF +15% DMSO来冻存 neurosphere的。
1 X+ `) y6 S/ Z$ z. [1 bhttp://www.natureprotocols.com/2 ... l_culture_neuro.php

huangfei2010

回复 2# xzmcyy@163.com
5 n; V6 t; N# a0 R1 o+ ?7 E+ `9 X
谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210 4 Y  b3 A/ ~! n' [) T

9 q3 X# Y- V3 u+ b# U# n: ]) n5 D4 k/ A& A& C7 A
    谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210
2 s! N3 b8 C5 `7 A7 o0 E
/ g% J; r, k+ i9 b& g2 Q" CRemove the supernatant and re-suspend the cells in 10.0 ml SFM (without EGF and FGF) containing 15.0% dimethyl-sulfoxide (DMSO)." E& K3 w$ V0 X5 ]
Neurosphere viability can also be enhanced by the addition of 20% fetal bovine serum (FBS) to the freezing medium. However, keep in mind that FBS will induce differentiation，谢谢你的文章

savid888

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10 ...
5 u3 a# S7 h  Z" x& Y  @2 fhuangfei2010 发表于 2010-5-19 09:48

  y* n1 V! _# l/ S1 G- b3 l" a

0 o2 x7 A! u, x- Y神经干冻存时还是多用serum-free培养基吧？我们就这样用的，但是复苏成活率确实比较低- b3 A/ T. |1 j) Q5 W
你说的文献是哪篇文献呐？

huangfei2010

回复 7# savid888
/ p1 ~8 |! [; @6 ?; l- _4 z" y9 W# ]9 c

1 N, [) H" Y$ M    文章发上来，你看下，能把你的冻存方法和相应文献也传上来吗，谢谢

savid888

我们冻存方法沿用师兄师姐的做法，没有文献呢。
2 e" _0 s8 d6 h8 a& T( r培养神经干用的无血清培养基+10% DMSO，梯度降温冻存

meirongwan

可以用全胎牛血请加dmso复苏更好