大鼠骨髓间充质干细胞的分离纯化及生物特性的初步鉴定

冰冰凉

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& ?& D2 M1 I# `+ B4 h; P6 b* \: D【英文题名】 Isolation, Purification and Primary Identification of Biological Characteristics of Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells 5 D5 S" q  g. [8 \/ e: B' g3 l/ l
【作者中文名】 肖銮娟;
, |0 }9 h% U& v6 l3 a. A【导师】 谢琪璇; / b- S; p1 J) t' n
【学位授予单位】 暨南大学;
! M; l  {2 A4 \3 M5 ?% `/ F" Q6 o【学科专业名称】 发育生物学
" J5 G: {$ G, c8 {4 x* u【学位年度】 2007 ! y8 X5 n8 I- z! w
【论文级别】 硕士
/ m1 C8 M5 M1 m$ ]* ^' x【网络出版投稿人】 暨南大学
6 b# h: O( L# J) I【网络出版投稿时间】 2007-11-23
$ Q) n" @, b1 R3 i: w4 G9 E【关键词】 骨髓间充质干细胞; 大鼠; CD抗原; 细胞周期; 染色体核型; 体内接种;
. }- O8 T+ H  Q3 H2 z( G3 Z4 W【英文关键词】 bone marrow mesenchymal sterm cells; rat; CD antigen; cell cycle; karyotype; transplant in vivo; * Q" m* T: U& S% O' Q
【中文摘要】 目的：比较两种大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的体外分离纯化方法，并初步鉴定MSCs的生物特性，为进一步研究其分化调控机制和应用打下基础。 方法：本研究分别利用人淋巴细胞分离液进行梯度密度离心法和全骨髓接种法对大鼠骨髓MSCs进行分离、纯化，并对这两种方法进行比较；比较MSCs的两种体外标记法：绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)转染法和Hoechst 33342标记法；比较不同培养代数(10代以内与50代以上)大鼠骨髓MSCs表面抗原CD45、CD44、CD29、细胞周期、染色体核型，并且用成脂、成骨诱导液分别对不同培养代数的MSCs进行体外诱导，观察其CD抗原变化并进行细胞染色，从而对MSCs的生物特性进行初步鉴定；对标记的大鼠骨髓MSCs进行成脂、成骨诱导，观察标记是否影响其分化。另外，用Hoechst 33342标记的大鼠骨髓MSCs(剂量为：10~6个细胞／只)分别对大鼠进行全身注射、腹腔和腹股沟接种，对MSCs体内接种的安全性进行初步试验。 结果：与梯度密度离心法相比，全骨髓接种法所获取的... 3 p+ {+ z5 T5 \  s1 e: c
【英文摘要】 Objective: Two methods were tried to compare the effects of isolation and purification in vitroof mesenchymal stem cells (MSCs) from rat bone marrow. Some biological characteristics ofMSCs were identified for further study in the mechanism of differentiated regulation andapplication of MSCs. Methods: MSCs from rat bone marrow were isolated and purified using the centrifugation ofgradient and density with human lymphocyte isolation liquid before culture or culturing directwith all bone marrow cells...
* \0 C8 g5 s9 F5 K/ U% _) C6 w【DOI】 CNKI:CDMD:2.2007.191406 ( q, X9 ?9 J9 D* E, A, B1 O; S
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