HUMSCs培养过程出现的3种细胞团现象请教（附图）

wuxiao101325

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一、连续传代培养至第8代出现：传代时铺板密度约为5000个/cm2，传至第8代时出现肉眼可见、分布均匀的细胞团，镜下观察如下图（放大100×），细胞团透亮，周围细胞小且圆鼓，继续传代仍有类似细胞团出现。
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二、高密度持续培养出现：细胞铺满瓶底后，持续培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团，镜下观察入下图（放大100×），细胞团中间的透光性差，周围的细胞扁平且边界模糊，随着培养时间的延续，细胞团逐渐增加，继续传代无此细胞团出现。
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三、较高铺板密度培养出现：细胞铺满板密度为1-4×104个/cm2，培养至第3代时，培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团，镜下观察入下图（放大40×），细胞团可透光，随着培养时间的延续，细胞团逐渐增加，且细胞团中样逐渐不可透光，继续传2代后无此细胞团出现。该细胞团茜素红染色和碱性磷酸酶染色为阴性或弱阳性。1 W5 d' ]" X! E: v1 U3 `

% J% o+ V: D6 I请教这是什么现象？什么原因导致？

wuxiao101325

谢谢海洋同学和各位胞友的支持，我终于升级了

wuxiao101325

开始我也怀疑是铺板不均所致，但是有几回我看到出现这种团状的地区在整个培养瓶（75cm2）底部都均匀分布（肉眼可见），所以排除了这一可能

wuxiao101325

那很可能是细胞增殖过快！: }9 H' m1 O9 e+ r% L
ambassador 发表于 2010-5-28 20:38

8 y3 `) f8 E. y1 t( w不排除这个可能，有文献介绍humsc有自发成骨的现象，不知这个是不是

wuxiao101325

回复 5# Iris ( _- v9 Y1 p0 Y/ q
HUCMSC

wuxiao101325

在这里--->
% Z% N! |2 w5 k! b9 G  M' moldmac7 发表于 2010-5-28 21:54

" f4 ]& `0 O! q1 n0 h! p谢谢分享

wuxiao101325

回复 11# zsc78
' j& T3 ^3 S8 G, [$ p" G/ N  h是消化成单个细胞悬液再接种的，也观察过，没有没消化散的情况，一般接种三天后才出现聚团现象

wuxiao101325

回复 12# xbs530515 6 S9 w. Z" Y2 B; L! U( ]: s
培养条件都没变，血清也是同批次的

wuxiao101325

回复 14# kqyy
/ H  Y7 |" B" }$ Z我基本上是按以下操作进行的：
3 P# ~) I3 A6 i3 @http://www.stemcell8.cn/thread-18220-1-1.html

wuxiao101325

回复 9# ambassador
6 i3 v7 b9 Y9 k& }这篇文献才是自发成骨的，见discussion 高亮部分