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HUMSCs培养过程出现的3种细胞团现象请教(附图)   [复制链接]

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发表于 2010-5-28 15:51 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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本帖最后由 细胞海洋 于 2010-5-28 15:57 编辑 : w1 p' K' s5 G
- s7 o$ X& y/ _4 k/ i0 [
一、连续传代培养至第8代出现:传代时铺板密度约为5000个/cm2,传至第8代时出现肉眼可见、分布均匀的细胞团,镜下观察如下图(放大100×),细胞团透亮,周围细胞小且圆鼓,继续传代仍有类似细胞团出现。
# A. E; Z8 {2 ?1 v% d1 G' N
- D* p  r9 r, g" t+ |$ }9 N4 m二、高密度持续培养出现:细胞铺满瓶底后,持续培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团,镜下观察入下图(放大100×),细胞团中间的透光性差,周围的细胞扁平且边界模糊,随着培养时间的延续,细胞团逐渐增加,继续传代无此细胞团出现。' Z) O0 f$ @! I( g
0 v+ }2 d! w5 l( X  v) ]' ^7 `0 E
三、较高铺板密度培养出现:细胞铺满板密度为1-4×104个/cm2,培养至第3代时,培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团,镜下观察入下图(放大40×),细胞团可透光,随着培养时间的延续,细胞团逐渐增加,且细胞团中样逐渐不可透光,继续传2代后无此细胞团出现。该细胞团茜素红染色和碱性磷酸酶染色为阴性或弱阳性。
( J" c2 f( I) U/ d; v. `- @: U- O+ @# t4 V( g8 |. K/ }
请教这是什么现象?什么原因导致?
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发表于 2010-12-27 22:06 |只看该作者
我的也出现过这种情况,用胰酶传代的话,就比较少见了,请问你是用什么方法传代啊?胰酶消化还是细胞刮刀啊?
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发表于 2010-12-27 16:39 |只看该作者
细胞增多后出现这种现象,是贴壁不好才成团吧.血清是否有问题?或者提供的贴壁因子和生长因子有问题?
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发表于 2010-12-23 23:16 |只看该作者
我有类似的现象出现
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发表于 2010-12-21 12:10 |只看该作者
跟我遇到的情况一模一样,并不是吹打不均匀和接种密度的问题。因为接种前几天是正常的,2,3天才开始出现这样情况,而且还成片卷起,同问。。。。
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发表于 2010-6-18 19:38 |只看该作者
你过滤试试
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发表于 2010-6-17 15:52 |只看该作者
是不是因为局部细胞增殖速度过快,造成细胞大量挤聚,形成复层结构,最后成团啊~我们以前也遇到过这种情况,消化传代后有所好转,但一段时间后又出现这种情况.原因不明,望有高手能指点迷津啊!
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发表于 2010-6-16 17:29 |只看该作者
回复 11# zsc78 0 f/ a1 B1 k. n; n  ^- H

- U* i9 f/ \1 e' j; E) D& w! V, N0 L! j* K  [
    未消化的细胞团是不能贴壁的吧。
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发表于 2010-6-16 13:13 |只看该作者
铺板不均,该传代了。
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发表于 2010-5-31 14:28 |只看该作者
回复 22# 透明微笑
, I/ Y& ~  ^" j- m神经球?请问你养什么细胞会出现神经球?0 I# k. h, F/ U* S
还有,我这个细胞如果是分化的话,传代应该也分化才对,但是我们传代后细胞形态还是很正常,直到细胞增多后才会又出现团状。
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