HUMSCs培养过程出现的3种细胞团现象请教（附图）

wuxiao101325

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一、连续传代培养至第8代出现：传代时铺板密度约为5000个/cm2，传至第8代时出现肉眼可见、分布均匀的细胞团，镜下观察如下图（放大100×），细胞团透亮，周围细胞小且圆鼓，继续传代仍有类似细胞团出现。# s( e$ s6 L9 E  z' o1 p

1 g4 F* I7 @6 p" Q4 t二、高密度持续培养出现：细胞铺满瓶底后，持续培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团，镜下观察入下图（放大100×），细胞团中间的透光性差，周围的细胞扁平且边界模糊，随着培养时间的延续，细胞团逐渐增加，继续传代无此细胞团出现。) `; _7 h' S- |0 L: k
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三、较高铺板密度培养出现：细胞铺满板密度为1-4×104个/cm2，培养至第3代时，培养3d左右出现肉眼可见、培养器皿边缘较多的细胞团，镜下观察入下图（放大40×），细胞团可透光，随着培养时间的延续，细胞团逐渐增加，且细胞团中样逐渐不可透光，继续传2代后无此细胞团出现。该细胞团茜素红染色和碱性磷酸酶染色为阴性或弱阳性。
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0 x0 O. T* F7 G4 t请教这是什么现象？什么原因导致？

wuxiao101325

谢谢海洋同学和各位胞友的支持，我终于升级了

wuxiao101325

开始我也怀疑是铺板不均所致，但是有几回我看到出现这种团状的地区在整个培养瓶（75cm2）底部都均匀分布（肉眼可见），所以排除了这一可能

wuxiao101325

那很可能是细胞增殖过快！
" j; h& b9 B& a9 T5 q/ N4 a8 _  hambassador 发表于 2010-5-28 20:38

3 }; e7 W+ m) @9 s% k
不排除这个可能，有文献介绍humsc有自发成骨的现象，不知这个是不是

wuxiao101325

回复 5# Iris 0 b% Y- b6 \: }* i9 @  C' r
HUCMSC

wuxiao101325

在这里--->6 V) j1 E) p8 Y; X# u0 Z5 E
oldmac7 发表于 2010-5-28 21:54

* j( x. [1 S% D8 c, m
谢谢分享

wuxiao101325

回复 11# zsc78
6 N* z$ n3 F1 h  h# l! Q" T9 d: N3 M是消化成单个细胞悬液再接种的，也观察过，没有没消化散的情况，一般接种三天后才出现聚团现象

wuxiao101325

回复 12# xbs530515 ( B$ |3 w5 D8 e7 i
培养条件都没变，血清也是同批次的

wuxiao101325

回复 14# kqyy
7 |4 i6 x' T) @: F9 {: v( g/ F我基本上是按以下操作进行的：
) ~, b% J' u& G/ \5 a! \3 Shttp://www.stemcell8.cn/thread-18220-1-1.html

wuxiao101325

回复 9# ambassador
6 h- O+ G% U% s' j- f1 z' W这篇文献才是自发成骨的，见discussion 高亮部分