脐带间充质干细胞的分离培养

马锡慧

大家好，我想向大家请教一下：脐带间充质干细胞的分离有两种方法，组织块贴壁和酶消化法7 u+ \+ @% @# q3 F! L8 e( |0 F* i" H
去血管和羊膜后，取华通氏胶剪碎后，若是组织块贴壁法，怎么操作才能使组织块很好贴壁呢？若是用胶原酶消化，是不是用胶原酶2啊？要消化多长时间为宜啊？具体的操作步骤是什么呢？

deshenglll

各有千秋吧。我们主要是用的组织块法。酶消化前期时间比较长。组织分离法现在做一份在35min左右。

get0715

我自己没有做过消化法，但做了很长时间脐带间充质干细胞分离的老师说的是组织块法爬出来的细胞比较纯，消化法杂细胞较多，且方法步骤多，污染的几率就增加了。我们一直都是将剪碎的组织块直接加到培养基中悬浮着培养，不用等贴壁了再加培养基，这种方法就是时间长，差不多要12天到14天才能传一代。个人认为组织块法可能较消化法分离出的细胞少。

willow0711

回复 wuxiao101325 的帖子
" l) {0 S# K/ F$ O0 n0 [" Q; U* E3 k$ a
刚接触这方面，想问下，你的组织块怎么除去呢？谢谢

hospitalshy

我也刚刚开始养hUCMSCs，希望能留个邮箱联系方式能够与你交流

鹭岛之滨

我们用的是贴壁法，但和wuxiao101325 的方法不一样，效果也还不错呀

cl5823283

我有师兄也是用IV型胶原酶，但我自己用II，感觉差不多

lchanlon

回复 9# xixitao
: H- P1 n2 I, r: E# x4 F
+ i0 V1 E' V7 L% J3 D# C
( u9 ^; x' W( k( I    用4型的胶原酶做可以吗？

xixitao

我用的2型胶原酶，文献上消化时间弹性很大，个人认为十小时左右，最好多观察消化状态

马锡慧

回复 7# study ( f& u6 k0 M! B3 |
; p* T  _  e8 I, S9 T2 N

& }; J5 d8 i! p7 T' q  j+ v    请问你用的胶原酶几型啊？