  
- 积分
- 24651
- 威望
- 24651
- 包包
- 144122
|
悬浮培养新突破!NPJ Breast Cancer:乳腺类器官助力ER阳性乳腺癌研究
, ] y2 e( u4 T: Y来源:生物谷原创 2025-01-04 14:21+ Y1 _+ q: K$ A" Y e
该研究成功建立了乳腺类器官悬浮培养方法,所培养的类器官形态大而均匀、增殖细胞比例高、能维持上皮细胞谱系保真度,且激素感应细胞可单独培养并保持高纯度和ER表达及响应性。0 V' V5 d( W/ p) V5 q
在医学领域,乳腺癌的研究一直是科学家们关注的重点与难点。雌激素受体(ER)在乳腺癌的发生和发展中扮演着至关重要的角色,多数乳腺癌为ER阳性。深入理解ER相关机制对攻克乳腺癌至关重要。然而,以往的研究受限于乳腺上皮细胞的培养条件,难以长期维持ER表达和雌激素响应性。
! `. d1 [0 B" J+ t' Z6 y$ Q7 q近期,发表于NPJ Breast Cancer的一项研究Breast organoid suspension cultures maintain long-term estrogen receptor expression and responsiveness带来了新的突破!
$ ], z* t; N! f- G2 I在这项研究中,研究人员开发了一种创新的乳腺类器官悬浮培养方法。这种方法不仅让类器官比传统Matrigel穹顶培养法更大、更均匀,还显著提高了增殖细胞的比例,更重要的是,它能够长时间保持上皮细胞谱系的保真度,并使激素感应细胞(HS细胞)单独培养时仍能保持高纯度和ER表达及响应性。这为研究ER阳性的乳腺癌提供了一个强有力的新工具。
. H5 @4 l% d7 A - o8 v! r4 o0 o3 u
在形态与增殖方面,悬浮培养的乳腺类器官表现出色。它们呈现出规则的球状结构,大小均匀,不再像传统培养方式下的类器官那样大小不一、形态各异。通过EdU标记及流式细胞术、Ki-67免疫荧光染色检测,发现悬浮培养的类器官中增殖细胞比例显著更高,且类器官大小与增殖细胞数量呈正相关,这意味着悬浮培养条件更有利于类器官的生长与增殖。+ l- s& f- d6 x1 G- R3 N, p
; n8 U( C) ~% D2 s7 n
图1. 悬浮培养产生的人类乳腺类器官比Matrigel穹顶培养法产生的类器官更大且更均匀
# g* U2 J: K9 t1 E) b9 e在细胞谱系维持上,悬浮培养同样表现出色。利用EpCAM和CD49f抗体的流式细胞术分析显示,基底/肌上皮(BA)细胞、管腔适应性分泌前体(LASP)细胞和激素感应(HS)细胞这三种主要上皮细胞类型在悬浮培养中均得以保留,且多数类器官系中HS细胞比例有所增加。免疫荧光检测进一步证实,三种细胞在单个类器官内呈有序分布,形成类似腺泡的稳定结构,而传统穹顶培养在传代过程中常难以维持这种结构。; H3 {. H4 S2 ~+ m5 G3 J
' P* U# C1 _& x7 g* J0 m7 z$ I图2. 悬浮培养的乳腺类器官比Matrigel穹顶培养法培养的类器官含有更高比例的增殖细胞/ K8 t' i) r, k3 n5 Z8 Q
对于HS细胞的研究更是取得了重要成果。通过FACS技术分离的HS细胞,在悬浮培养中能迅速形成致密结构。经过长时间培养和多次传代,流式细胞术分析表明多数类器官系中HS细胞纯度极高,超过70%的类器官系中HS细胞占比达70%以上,部分甚至超90%。: l- m5 ?9 ?) ~9 X* w
免疫荧光染色显示HS细胞主要表达FOXA1,基本不表达LASP和BA细胞标记物。RNA-seq分析也表明,单独培养的HS细胞与混合培养的HS细胞在基因表达上高度相似,且长期培养后仍稳定维持ER表达与雌激素响应性。- D; y1 M5 g; R
在雌激素刺激实验中,对培养超两个月的类器官和HS细胞进行处理后发现,经雌激素和孕酮刺激,ER信号通路相关基因如PR、TFF1、GREB1和WNT4等表达显著改变,添加TGFβ抑制剂后,ER下游基因诱导增强。这充分证明悬浮培养的类器官和HS细胞在长期培养中能维持ER信号通路活性。
' ]! u. ~; g% _8 b) G4 J6 N 3 t0 v. z4 B: u" n+ J y! y. q
图3. 在悬浮液中培养的类器官和HS细胞可以在雌激素刺激下激活ER信号转导
- v0 y" W d; j8 c这项研究不仅仅是乳腺癌领域的重大进展,它简化了培养流程,提高了实验可操作性,为大规模研究奠定了基础。更重要的是,它稳定维持ER相关特性的能力,为深入探究ER阳性乳腺癌发病机制提供了有力工具,有望推动乳腺癌早期诊断与精准治疗的发展。未来,这一创新的悬浮培养方法将在乳腺癌研究中发挥重要作用,帮助科学家们揭开更多关于乳腺癌的秘密,为患者带来新的希望。(生物谷Bioon.com)
) A+ }* K; M9 {8 C" R" ]. h/ }: `' R% P参考文献:
3 L% S/ O+ M0 Q% X4 D6 w* q( w9 HChang KC, Silvestri F, Oliphant MUJ, et al. Breast organoid suspension cultures maintain long-term estrogen receptor expression and responsiveness. NPJ Breast Cancer. 2024;10(1):107. Published 2024 Dec 19. doi:10.1038/s41523-024-00714-7. n) Y2 D1 x$ T N
# t2 j, H5 N8 B" U3 W8 b/ u
|
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
|